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[主观题]

克隆文库的构建通常是以一个识别4个碱基序列的限制酶(这些酶切割频率相对较高,平均每256碱基对有1个切点)不

克隆文库的构建通常是以一个识别4个碱基序列的限制酶(这些酶切割频率相对较高,平均每256碱基对有1个切点)不完全消化基因组DNA完成的。酶Sau3AI识别序列是5'-\GATC-3'(只写上面一条链,\表示切割位点)。这个位点有一个优点,即Sau 3AI消化片段可被克隆入以BamHI(5'-G\GATC-3')或BglⅡ(5'-A\GATCT-3')消化的载体上。图16-3-17是YFG1基因周围Sau3AI位点的限制性图谱,请列出以Sau3AI完全消化这个片段得到限制性片段的大小,以及不完全Sau3AI消化时产生片段的大小。如果分离一个包含完整YFGl基因的片段,以不完全消化建立文库的重要性在哪里呢?

克隆文库的构建通常是以一个识别4个碱基序列的限制酶(这些酶切割频率相对较高,平均每256碱基对有1个

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第1题
一旦克隆了一个遗传定位的基因,就可以用______技术来鉴定基因组DNA文库中与之相邻的基因克隆。
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第2题
EST是______,是通过从cDNA文库中随机挑选克隆,进行一轮单向测序所获得的序列,通常为几十到500bp左右,他们大
多不是完整的基因序列,但携带了表达基因的部分遗传序列。
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第3题
利用简单重复序列(SSR)作探针从文库中分离出几个克隆。现在要鉴定与这些重复序列毗邻的单一序列,

利用简单重复序列(SSR)作探针从文库中分离出几个克隆。现在要鉴定与这些重复序列毗邻的单一序列,以期在基因组中建立基于SSR的STS。 (1)如何鉴定分离出的克隆中是否有单一序列? (2)最有用的STS是那些与人群中存在多态性的SSR相连的STS。如何鉴定一个STS是否与多态性的SSR相连?

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第4题
从cDNA文库中随机检出成千上万的克隆,单边测序后产生的cDNA标记称为_________。

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第5题
在cDNA文库中,分离到两个不同的cDNA克隆,都可以与神经生长因子探针杂交。两个克隆开始区和终止区
序列相同,中间的序列不同。如何解释这个结果?

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第6题
以λ噬菌体载体和黏粒载体构建文库时,起始DNA的长度是不同的,前者为______kb,后者为______kb。
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第7题
为什么构建基因组文库时,常常用胚胎组织或精子来分离染色体DNA?
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第8题
免疫球蛋白V区基因TATA盒的上游有一个必需的、保守的八聚体基序( )

A.六聚体基序

B.七聚体基序

C.八聚体基序

D.九聚体基序

E.十聚体基序

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第9题
人类基因组DNA经过Sau3A(G↓ATC)部分酶切后,连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上 (G↓GATCC)。BamHⅠ位于

人类基因组DNA经过Sau3A(G↓ATC)部分酶切后,连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上 (G↓GATCC)。BamHⅠ位于多克隆位点的SalⅠ和NotⅠ之间,二者距离20 bp。 (1)从文库中分离出某克隆(克隆1),分别用NotⅠ(N)、SalⅠ(S)或SalⅠ十NotⅠ(S十N)酶切后,电泳分离并用EB染色。DNA转移到膜上后,用载体上的DNA作为探针进行杂交,结果如下图所示:

假设同源序列50 bp以下则无杂交信号。在此基因组DNA上标上所有的SalⅠ和NotⅠ位点,标明酶切位点间距离。 (2)从同样的文库中分离到带有重叠片段的克隆(克隆2),用同样的酶切、电泳、转膜后,以克隆1的DNA为探针(包括基因组DNA和载体DNA)进行southern杂交,结果如下图所示:

画出克隆2的图,标明所有SalⅠ和NotⅠ位点及位点间距离。 (3)所有的人类基因组DNA都用SalⅠ酶切,并用来自于克隆1或克隆2的DNA为探针作Southern杂交,结果如下图所示:

其中6个SalⅠ切点的位置可以用以上的结果来确定。请画出这一区域的SalⅠ位点图。

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第10题
免疫球蛋白V区基因TATA盒的上游有一个必需的、保守的七聚体基序。()

免疫球蛋白V区基因TATA盒的上游有一个必需的、保守的七聚体基序。( )

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第11题
同源区蛋白与锌指蛋白有很大的不同,但这两个家族都使用一个类似结构的保守基序(motif)。这是怎么回事?

同源区蛋白与锌指蛋白有很大的不同,但这两个家族都使用一个类似结构的保守基序(motif)。这是怎么回事?

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