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[主观题]

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DNA分子用EcoRI消化可得如图16-3-6所示的限制酶图谱(数字代表自分子左端起每个切点的相对距离)。在某次实验中(将消化的样品加热至65℃),凝胶电泳图谱中不是呈现预期的5条带,而是另一种情况,试作解释。

DNA分子用EcoRI消化可得如图16-3-6所示的限制酶图谱(数字代表自分子左端起每个切点的相对距

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第1题
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表16-2-11

酶混合物片段长度(kb)
EcoRI

EcoRI,BamHI

EcoRI,HpaI

EcoRI,SalI

EcoRI,BglII

EcoRI,PstI

PstI,BglII

BglII,HpaI

5.7

0.4,5.3

0.5,5.2

0.7,5.0

1.1,4.6

2.4,3.3

1.3,4.4

0.6,5.1

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第2题
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表16-2-10

酶混合物片段分子量(×106U)
EcoRI,PstI

EcoRl,BamHI

EcoRI,HindⅢ

EcoRI,SalI

EcoRI,BamHI,PstI

0.64.2.14

0.2.2.4

0.05.2.55

0.55.2.05

0.2.0.64.1.94

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第3题
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第6题
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用一种限制性内切核酸酶消化某大型的环状质粒DNA。得到的片段随机重装配(即片段不再按原来顺序排列),选择与原来质粒分子量相同的环状分子。然后用由这些片段组成的分子感染不含质粒的宿主细胞。

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第7题
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你纯化出经BamHI消化重组质粒DNA所得的两个DNA片段,其中一个长为400bp,另一个长900bp,你想要如图16-3-20(1)所示将它们连接起来产生一个杂合基因,如果你的推测是正确的话,就会得到令人惊奇的新物质。

你在DNA连接酶存在情况下将两种片段混合在一起并且进行孵育,30分钟后和8小时后,你取一些样品进行琼脂糖凝胶电泳分析,你惊讶地发现连接得到了一系列复杂的DNA片段而不是所需的1.3kb小片段,并且发现孵育时间越长,小片段浓度越低而大片段浓度增加,如果你用BamHI切割连接后的重组体,你会重新获得开始的两片段(图16-3-20(2)A)。

令人吃惊的是,你将从琼脂糖凝胶中纯化得到的1.3kb片段用BamHI消化,检查它的结构,与预想的一样,可以得到最初的两片段(图16-3-20(2)B)。这就可以确定这是你所需的结构。但是,你用EcoRl消化另一份样品,你希望通过消化得到300bp的片段和700bp的片段,但你跑的电泳是一系列DNA片段(图16-3-20(2)B)。

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第8题
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第9题
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第10题
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第11题
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