A.用特异性抗体筛选表达型cDNA文库
B.对该基因编码的蛋白质进行分析来推测
C.对该基因表达的mRNA进行分析来推测
D.将病人的相应基因与正常人进行比较
E.转基因技术
A.它能为人类基因组数目提供较为可靠的依据
B.它提供不同组织(空间)、不同发育阶段(时间)基因表达的数目、种类及结构,特别是序列的信息
C.提供目的基因用于基因治疗
D.提供了鉴定基因的探针,以EST就可以从“全长cDNA文库”到全长cDN
E.再进而从不同“基因组文库”中筛选全长的基因
F.F.本身就有直接的经济价值,如作为基因诊断的探针
A.人类基因组中长约200-600bp的单拷贝片段
B.人类基因组中2—6bp呈串联重复的DNA序列
C.人类基因组小长约150—400bp的cDNA文库表达序列
D.两顺序相同的互补序列在同一条DNA链上相反方向排列构成反倒位重复
E.两顺序相同的互补序列在同一条DNA链上相同方向排列构成倒位重复
当处理过的细胞分化时,大约25%的细胞转变为肌肉细胞(肌原纤维),肌原细胞形成的高频率导致一种假说的建立,一个独立的主调控基因,它正常情况下由于甲基化受到抑制,它可以启动完整的转化。估计这个基因在用5'-氮化胞苷处理前是处于关闭状态,而在诱导的肌原细胞中呈开放状态。如果这个设想是真的,在用5'-氮化胞苷处理后的mRNA的cDNA拷贝中应能找到与这个用5'-AzaC处理后就开始启动的基因有关的序列。对策是应用一套放射性探针从正常肌原细胞(这种细胞按照你的设想也能表达这个基因)获得的cDNA文库中挑选可能的cDNA克隆。应准备三种放射性探针:
探针1:从5'-氮化胞苷诱导的肌原细胞中分离RNA,制备含放射性的cDNA探针。
探针2:用5'-AzaC处理的肌原细胞中的有放射性的cDNA与未经处理的10T1/2细胞中的RNA进行杂交,除去所有的RNA和DNA杂合体。
探针3:从正常的肌原细胞中分离RNA,制备放射性DNA探针,然后与未经处理的10T1/2细胞中的RNA杂交,除去所有的RNA和DNA杂合体。
第一个探针同cDNA文库中的大多数克隆发生了杂交,但是这些克隆中只有约1%的克隆与探针2或探针3进行杂交。总之,有四种独特的杂交模式(表13-3-54)。
表13-3-54 | |||
Class | Probe 1 | Probe 2 | Probe 3 |
A B C D | + + + + | — — + + | — + — + |