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cDNA文库(cDNA library)

cDNA文库(cDNA library)

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第1题
从cDNA文库中随机检出成千上万的克隆,单边测序后产生的cDNA标记称为_________。

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第2题
_________是制备高质量cDNA文库的前提。

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第3题
在cDNA文库中,分离到两个不同的cDNA克隆,都可以与神经生长因子探针杂交。两个克隆开始区和终止区
序列相同,中间的序列不同。如何解释这个结果?

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第4题
先进行差示杂交,杂交后再制备cDNA文库,以提高特定条件下表达基因的概率。 ()此题为判断题(对,错)。
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第5题
EST是______,是通过从cDNA文库中随机挑选克隆,进行一轮单向测序所获得的序列,通常为几十到500bp左右,他们大
多不是完整的基因序列,但携带了表达基因的部分遗传序列。
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第6题
可以获得疾病相关基因的方法是( )

A.用特异性抗体筛选表达型cDNA文库

B.对该基因编码的蛋白质进行分析来推测

C.对该基因表达的mRNA进行分析来推测

D.将病人的相应基因与正常人进行比较

E.转基因技术

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第7题
现阶段,转录图与EST不具有的现实意义是()。

A.它能为人类基因组数目提供较为可靠的依据

B.它提供不同组织(空间)、不同发育阶段(时间)基因表达的数目、种类及结构,特别是序列的信息

C.提供目的基因用于基因治疗

D.提供了鉴定基因的探针,以EST就可以从“全长cDNA文库”到全长cDN

E.再进而从不同“基因组文库”中筛选全长的基因

F.F.本身就有直接的经济价值,如作为基因诊断的探针

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第8题
序列位置标签(STS)是一段短的DNA序列,通常是指()。

A.人类基因组中长约200-600bp的单拷贝片段

B.人类基因组中2—6bp呈串联重复的DNA序列

C.人类基因组小长约150—400bp的cDNA文库表达序列

D.两顺序相同的互补序列在同一条DNA链上相反方向排列构成反倒位重复

E.两顺序相同的互补序列在同一条DNA链上相同方向排列构成倒位重复

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第9题
小鼠胚胎细胞成纤维细胞细胞系10T1/2是一个非常稳定的细胞系,它的细胞以及细胞的行为看起来都与正常成纤维
细胞相似。如果这些细胞在含5'-氮化胞苷的培养基中培养24小时,随后当它们长到很高的密度时,用5'-Azac处理会降低DNA甲基化的正常水平,使原先没有活性的基因活化为开放基因。它们将分化为软骨细胞、肥大细胞和肌肉细胞。如果这些细胞用5'-AzaC处理过后,在低细胞浓度下生长,它们保持原有成纤维细胞的特性,但是当生长许多代后,细胞达到高密度时又会分化。10T1/2细胞如果不曾用5'-氮化胞苷处理过,无论细胞浓度如何都不会引起分化。

当处理过的细胞分化时,大约25%的细胞转变为肌肉细胞(肌原纤维),肌原细胞形成的高频率导致一种假说的建立,一个独立的主调控基因,它正常情况下由于甲基化受到抑制,它可以启动完整的转化。估计这个基因在用5'-氮化胞苷处理前是处于关闭状态,而在诱导的肌原细胞中呈开放状态。如果这个设想是真的,在用5'-氮化胞苷处理后的mRNA的cDNA拷贝中应能找到与这个用5'-AzaC处理后就开始启动的基因有关的序列。对策是应用一套放射性探针从正常肌原细胞(这种细胞按照你的设想也能表达这个基因)获得的cDNA文库中挑选可能的cDNA克隆。应准备三种放射性探针:

探针1:从5'-氮化胞苷诱导的肌原细胞中分离RNA,制备含放射性的cDNA探针。

探针2:用5'-AzaC处理的肌原细胞中的有放射性的cDNA与未经处理的10T1/2细胞中的RNA进行杂交,除去所有的RNA和DNA杂合体。

探针3:从正常的肌原细胞中分离RNA,制备放射性DNA探针,然后与未经处理的10T1/2细胞中的RNA杂交,除去所有的RNA和DNA杂合体。

第一个探针同cDNA文库中的大多数克隆发生了杂交,但是这些克隆中只有约1%的克隆与探针2或探针3进行杂交。总之,有四种独特的杂交模式(表13-3-54)。

表13-3-54

ClassProbe 1Probe 2Probe 3
A

B

C

D

+

+

+

+

+

+

+

+

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第10题
互补DNA(cDNA,complementary DNA)

互补DNA(cDNA,complementary DNA)

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第11题
cDNA芯片系统误差校正方法。
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