题目内容
（请给出正确答案）
有-8.8kb含四环素抗性基因的重组质粒，要将其转入大肠埃希氏菌DH5α(对四环素没有抗性)中，用什么方法可以实现这一过程，写出实验步骤
如果结果不匹配，请 联系老师 获取答案
更多“有-8.8kb含四环素抗性基因的重组质粒，要将其转入大肠埃希…”相关的问题
质粒pHUBI DNA是双链环状，长5.7kb(5.7×103个碱基对)。这个质粒带有某基因，它的蛋白质产物使宿主细菌对四环素具有抗性(Tet-r)。该DNA对下列每种限制酶具有一个识别位点：EcoRI、HpaI、BamHI、PstI、SalI、BglII。在BarnHI和SalI位点处克隆会破环四环素抗性；在其他酶的位点处克隆则保留四环素抗性。用各种限制酶以及酶混合物消化可得到如表16-2-11所列的DNA片段。试在pHUBIDNA图上标出所有这些酶的切点。将DNA图画成环形，在圆周上以5.7kb总长标出刻度。
| 表16-2-11 | |
| 酶混合物 | 片段长度(kb) |
| EcoRI EcoRI，BamHI EcoRI，HpaI EcoRI，SalI EcoRI，BglII EcoRI，PstI PstI，BglII BglII，HpaI | 5.7 0.4，5.3 0.5，5.2 0.7，5.0 1.1，4.6 2.4，3.3 1.3，4.4 0.6，5.1 |
质粒pBR607DNA是双链环状的，分子量为2×106U。这个质粒带有两个基因，它们所编码的蛋白质产物使宿主细菌对四环素和氨苄青霉素具有抗性(Tet-r和Amp-r)。该DNA对下列限制酶只有一个识别部位：EcoRI、BamHI、HindⅢ、PstI和SaII。将DNA克隆到EcoRI部位并不影响对两种药物的抗性。将DNA克隆到BamHI、HindⅢ和SaII部位则破坏四环素抗性。克隆到PstI部位破坏氨苄青霉素抗性。用下列限制酶混合物消化可得到如表16-2-10所列的片段。试在限制酶图上标出相对于EcoRI切点的PstI、BamHl、HindⅢ和SalI的切点。
| 表16-2-10 | |
| 酶混合物 | 片段分子量(×106U) |
| EcoRI，PstI EcoRl，BamHI EcoRI，HindⅢ EcoRI，SalI EcoRI，BamHI，PstI | 0.64.2.14 0.2.2.4 0.05.2.55 0.55.2.05 0.2.0.64.1.94 |
二氢叶酸还原酶缺陷型(dfr-)仓鼠细胞株用质粒转化，该质粒含dfr-结构基因，并与激素诱导基因的启动基因以及另一个在本系统是显性选择标记的基因xgp相连。转化细胞根据合成Xgp的能力进行选择。所有这些挑选的细胞也都能合成Dfr。用剂量递增的氨甲蝶呤处理细胞。选择出一株细胞，比出发的转化细胞对氨甲蝶呤的抗性高200倍，同时Dfr酶含量也高200倍。
大肠杆菌Q是recA-(即细菌重组缺陷)，含λ原噬菌体的一小部分片段J基因和原噬菌体附着位，J基因是突变的，它编码h的性状。野生型λ不能吸附于λ抗性菌株K/λ，而带有h标记的突变型λ不能够吸附。若将λcI突变体涂布在以1:3混合而成的Q和K/λ菌苔上，得到的噬菌斑虽略显混浊，但仍清晰可见。从噬菌斑回收的许多噬菌体可以在K/λ上形成噬菌斑。将诱变处理过的λcI-原种培养在上述混合菌苔上，可以发现某些噬菌斑非常混浊，几乎看不清。这些噬菌斑中不含能在KλcI上形成噬菌斑的噬菌体。试问这些产生非常混浊噬菌斑的噬菌体可能呈怎样的基因型？
