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[主观题]

部分酶切是指控制反应条件,使得酶在DNA序列上的识别位点只有部分得到切割,它的理论依据是______。

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第1题
部分填补是DNA体外重组中常用的一种技巧,填补时应( )。

A.控制DNA聚合酶的用量

B. 控制酶反应的时间

C. 限制dNTP的种类

D. 注意只能填补载体

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第2题
从两个人的血细胞中抽提DNA,并分别用A、B、C三种不同的限制性内切核酸酶进行切割,假定获得一长度为10kb的DNA
酶切图谱(图Q25.10)。发现样品2有点突变,使得B*、C*切割位点丢失。请设计一种实验方案,利用图中所示的DNA区段作为探针,进行指纹和RELP分析。

图Q25.10 10kb片段二种酶切图谱

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第3题
关于DNA重组连接,以下叙述正确的是

A.同聚尾法连接效率高,且易回收插入的片段

B.不匹配的黏性末端可通过部分填补后连接

C.限制酶切割DNA后加入EDTA-SDS终止液抑制限制酶活性,将有利于重组连接

D.平末端连接时,在反应体系中加入适量凝聚剂可提高连接效率

E.Mg2+/ATP是T4DNA连接酶反应时的必要因素

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第4题
限制性片段长度多态性(RFLP)()。

A.与基因组DNA个体差异有关

B.用于分析基因缺陷

C.按孟德尔方式遗传

D.DNA分子一级结构差异引起

E.指不同限制性内切核酸酶的酶切差异

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第5题
逆转病毒的整合酶: A.是位点专一的内切酶。 B.作为外切酶作用在LTR上。 C.在靶DNA上产生错开的切割。

逆转病毒的整合酶:

A.是位点专一的内切酶。

B.作为外切酶作用在LTR上。

C.在靶DNA上产生错开的切割。

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第6题
用HindⅢ限制酶处理某DNA大分子,得到一个DNA片段。该酶作用于如图2-3-50A中箭头所示的特定碱基顺序。为测定每

用HindⅢ限制酶处理某DNA大分子,得到一个DNA片段。该酶作用于如图2-3-50A中箭头所示的特定碱基顺序。为测定每条链的顺序,将5'-末端用32P标记(通过多核苷酸激酶催化的反应),再用Maxam-Gilbert序列法测定。切得片段的混合物经电泳后可得到如图2-3-50B所示的图谱(图中迁移方向为自上而下,片段越小移动距离越远)。仔细观察一下电泳图谱,回答下列问题:

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第7题
人类基因组DNA经过Sau3A(G↓ATC)部分酶切后,连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上 (G↓GATCC)。BamHⅠ位于

人类基因组DNA经过Sau3A(G↓ATC)部分酶切后,连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上 (G↓GATCC)。BamHⅠ位于多克隆位点的SalⅠ和NotⅠ之间,二者距离20 bp。 (1)从文库中分离出某克隆(克隆1),分别用NotⅠ(N)、SalⅠ(S)或SalⅠ十NotⅠ(S十N)酶切后,电泳分离并用EB染色。DNA转移到膜上后,用载体上的DNA作为探针进行杂交,结果如下图所示:

假设同源序列50 bp以下则无杂交信号。在此基因组DNA上标上所有的SalⅠ和NotⅠ位点,标明酶切位点间距离。 (2)从同样的文库中分离到带有重叠片段的克隆(克隆2),用同样的酶切、电泳、转膜后,以克隆1的DNA为探针(包括基因组DNA和载体DNA)进行southern杂交,结果如下图所示:

画出克隆2的图,标明所有SalⅠ和NotⅠ位点及位点间距离。 (3)所有的人类基因组DNA都用SalⅠ酶切,并用来自于克隆1或克隆2的DNA为探针作Southern杂交,结果如下图所示:

其中6个SalⅠ切点的位置可以用以上的结果来确定。请画出这一区域的SalⅠ位点图。

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第8题
DNA计算机的原理是:DNA分子中的大量密码相当于存储的数据,某些酶对DNA分子作用,瞬间就能完成其生化反应,从
一种基因代码变成另一种基因代码。反应前的基因代码可以作为输入的数据,反应后的基因代码则作为运算结果。如果这种反应控制得当,就能制成DNA计算机。
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第9题
描述内切酶在构建未知DNA的物理图谱中的作用。基因的什么基本特点使限制性分析适合于作图谱?
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第10题
将下列对应部分连线 a.寡核苷酸 ①用作运载、复制和纯化DNA片段的DNA.分子 b.载体
②收集某物种的DNA片段,再插入载体 c.黏性末端 ③由反转录酶以RNA为模板复制出的DNA拷贝 d.重组DNA ④单链DNA间相互稳定地结合 e.反转录 ⑤扩增DNA片段的快速而有效的手段 f.基因组文库 ⑥推断某段多肽的氨基酸序列所对应的核苷酸序列的方法 g.基因组平衡 ⑦含有从两个不同物种而来的遗传物质 h.cDNA ⑧含有某物种整个基因组的一组DNA片段 i.PCR ⑨存在于许多限制酶酶切片段末端的单链DNA序列 j.杂交 ⑩可用机器合成的短DNA片段

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第11题
入噬菌体的线性基因组DNA两端各有一段20个碱基长的单链突出,它们是可以互补的黏性末端,可以连接
起来,使DNA环化。在试管中分别对线性和环状DNA进行限制酶切割 (EcoRⅠ、BarnHⅠ或同时用二者),结果如下页图所示: (1)哪个样品是环状DNA分子? (2)线形DNA总长度是多少? (3)环状DNA的总长度是多少? (4)画出线形DNA的限制酶酶切图谱,标明EcoRⅠ和BamHⅠ所有位点。

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