参与DNA解旋解链的物质有哪些( )
A.DNA-pol
B.SSB
C.解螺旋酶
D.拓扑异构酶
E.DNA连接酶
A.DNA-pol
B.SSB
C.解螺旋酶
D.拓扑异构酶
E.DNA连接酶
原核生物启动子在-35和-10处有两个中心,-10处的序列对DNA解链有重要作用,此处()。
A.富A-T
B.富G-C
C.A-T、G-C各半
E.coli的dnaB基因编码一个解旋酶DnaB松弛复制叉处的DNA。用人工底物研究其性质如图6-3-9所示。这个实验的方法是把底物在不同的环境下培养,然后进行琼脂糖电泳。短的单链如果仍与长的DNA链一起退火(annealed),则移动得慢些,但如果单链松弛或与长的DNA链分开,则其会移动得很快。放射性标记后能根据放射自显影给单链定位,从而有选择地跟踪其迁移。
几个实验的结果如图6-3-9所示。底物1是无尾的氢化物,并没有被DnaB松弛(图6-3-9A,1,2行)。然而,当有尾底物在37℃与DnaB和ATP温育时,由于解旋产生大量小片段(6和10行)。对底物3而言,只有3'半片段是解旋的(10行)。所有的解旋都依赖于ATP水解。
通过加入单链DNA结合蛋白(SSB)(比较5和6行,9和10行),解旋速度明显加快。有趣的是,SSB必须在DnaB加入后3分钟左右加入,否则将抑制解旋。
在RNA聚合酶Ⅱ起始转录之后,起始复合物改变为延伸复合物(elongation complex),而这需要聚合酶复合物将一段短的DNA区解旋。对于线性DNA,这种解旋需要ATP、TFⅡE、TFⅡH和解旋酶活性,但是超螺旋DNA的解旋却不需要这些因子。试解释之。
分离到一种突变型噬菌体,其DNA具有以下性质:(1)从该噬菌体提取的DNA沉降时表现为单一组分(A结构),其沉降系数不大受离子强度的影响;(2)A分子不与甲醛反应,且吖啶类化合物使其粘度增加而使沉降系数下降;(3)在pH12.5条件下沉降时表现为两种组分,沉降快的组分的量是慢的组分的两倍(根据吸收值测定);(4)若将A加热至低于解链温度10℃再迅速冷却,可得到B和C两种组分,其沉降系数不同;但若慢慢冷却,则只得到一种沉降组分,且其沉降系数与A相同;(5)用核酸外切酶Ⅲ对A进行部分酶解,再退火,则产生D结构,其沉降系数高于A;(6)D用DNA连接酶处理,产生E,E在碱性条件下沉降表现为单一组分,其沉降速度比较大且变性的A至少快四倍;(7)当poly(G)加入热变性的A中,在CsCl密度梯度中发现两条浮力密度不同的带;(8)若A用连接5'-P和3'-OH和DNA连接酶处理,再通过多核苷酸激酶做32P末端标记,然后酶解至单核苷酸,发现两种放射性核苷酸dAMP和dGMP。若在标记后酶解前将该链打成片段,则发现标记的dGMP与结合有较多poly(G)的那条链结合。该噬菌体DNA具怎样的结构?
A.存在于单链DNA序列上
B.存在于双链DNA序列上
C.其表达需要DNA双链解旋
D.其表达需要DNA的高级构象
E.其表达不需要反式作用因子