在大肠杆菌中,碱性磷酸酯酶(APase)由基因phoA编码。如果把APase所催化的反应产物磷酸盐加入细胞培养物,在生长中细胞的APase的合成明显受到抑制。还有两种其他基因phoB和phoR似乎也参与phoA表达的调节;phoB中的突变导致在磷酸盐存在或不存在的条件下APase合成的减少。phoR中的突变导致APase呈组成型的合成(见表10-2-24)。我们知道phoB和phoR基因各产生一种蛋白质,所以表10-2-24中所示的突变不代表顺式作用的突变。我们也知道phoA基因是受到转录控制的调节。假定除了上述蛋白质外,没有其他蛋白质或小分子参与调节phoA基因。
表10-2-24 | ||
突变体 | 在磷酸盐存在与否时,APase的相对浓度 | |
无 | 有 | |
phoA+phoB+phoR+ phoA-phoB+phoR+ phoA+phoB-phoR+ phoA+phoB+phoR- phoA+phoB-phoR- | 100 0 0 100 5 | 20 0 1 100 5 |
嗜盐菌可合成膜蛋白视紫红质(相对分子质量为26000),呈紫色是由于它含有视黄醛。该蛋白质分子凝聚在细胞膜上形成一个“紫色通道”。X射线分析表明它由7段平行的α-螺旋片段组成,每段都横跨4.5nm厚的细胞膜。计算能完全跨越细胞膜的每段α-螺旋最少需由多少氨基酸组成?估计视紫红质中,参与跨膜螺旋的蛋白质部分占总蛋白质的百分比。
F.W.Stahl的实验室做过下列实验。基因型为red-gamA-的噬菌体λ用13C和15N进行密度标记,再与含13C和14N的λred-gainR-混合。用该混合液在下述条件下感染大肠杆菌:抑制DNA的复制;每个细菌感染10个病毒颗粒。所产生的噬菌体在硫酸铯中离心平衡,检测分布在密度梯度中的基因型,可以观察到如图12-3-12所示的全部噬菌体和A+R+重组子的分布图谱。在第二个实验中,两种噬菌体都含有突变,该突变位置是在噬菌体遗传图左端约93%处,该实验结果见图12-3-12B。试解释两个实验结果。
图Q2.3研究大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ校正功能的人工底物黑体字母表示被放射性标记的核苷酸
图Q2.4 DNA聚合酶Ⅰ在不含dTTP(a)和含有dTTP(b)时的校正功能