某纯化的RNA分子经T1核糖核酸酶彻底酶解,然后分离寡核苷酸产物。其中一个片段经碱水解产生1腺苷,1Up,和2Cp残
某纯化的RNA分子经T1核糖核酸酶彻底酶解,然后分离寡核苷酸产物。其中一个片段经碱水解产生1腺苷,1Up,和2Cp残基。同一片段用多核苷酸激酶和γ-32P-ATP处理,继而用蛇毒磷酸二酯酶彻底酶解,产生带放射性的pU和非放射性的pC和pA。
某纯化的RNA分子经T1核糖核酸酶彻底酶解,然后分离寡核苷酸产物。其中一个片段经碱水解产生1腺苷,1Up,和2Cp残基。同一片段用多核苷酸激酶和γ-32P-ATP处理,继而用蛇毒磷酸二酯酶彻底酶解,产生带放射性的pU和非放射性的pC和pA。
测定纯化的小分子RNA碱基顺序时,通常第一步是用T1核糖核酸酶对RNA进行有限时间的处理,将RNA降解成两个、三个或四个片段,并用离子交换柱进行分离。
A.rRNA碱基序列是高度保守的,而核糖体蛋白的氨基酸序列则不然。
B.具有对抗生素抗性的细菌在rRNA分子中有取代的碱基,而在核糖体蛋白质中没有被取代的氨基酸。
C.肽酰转移酶的反应对核糖核酸酶敏感。
D.上述都是。
mRNA往往是用各种杂交技术检测的,也就是通过mRNA与单链DNA一起保温,形成DNA-RNA杂交物。有一种技术,把单链DNA吸附在硝酸纤维素滤膜上,加上放射性标记的RNA,然后在导致杂交作用的条件下将混合物保温。游离RNA并不结合到滤膜上,所以滤膜洗涤后所结合的放射性量就是被杂交的RNA量。在某实验中,从感染噬菌体1分钟的细胞中分离出放射性mRNA,然后与分别吸咐在滤膜上的三种不同的DNA分子杂交。DNA分子如图9-3-10所示,其中的数字表示离DNA左侧的距离,相对距离范围为0~100。用野生型噬菌体(Ⅰ)感染细菌。在噬菌体DNA分子Ⅱ和Ⅲ中的阴影区代表噬菌体携带的细菌DNA。接着在两张滤膜上对各类DNA进行杂交试验,吸附有每一类DNA的一张滤膜与核酸酶一起保温(RNase,该酶酶解单链RNA但不酶解杂交的RNA);另一张滤膜不用酶处理(-RNase)。得到的数据如表9-3-10所示。试问mRNA从野生型DNA中的哪个区域转录?
表9-3-10 | ||
滤膜上的DNA | 滤膜上的cpm | |
-RNase | +RNase | |
Ⅰ Ⅱ Ⅲ | 1250 1260 1240 | 1245 418 820 |
利用一个包含纯化的RNA聚合酶的核心酶、DNA模板、σ因子以及标记核苷酸(32pppN)的系统,来研究σ因子在原核转录中的作用。在10-10mol和10-11mol两种不同浓度的核心酶催化下32P掺入到RNA的图如下所示,σ因子浓度恒定为10-12mol。
核酸酶S1能在双链DNA分子中将不配对的两碱基打断,如果从美国实验室分离到一种品系的λ噬菌体DNA分子与从法国实验室分离到的假定基因型是同一品系的λ噬菌体DNA分子杂交,接近一半的杂交DNA分子被S1酶切开,请解释。