A.在260nm波长处的吸光度增加
B.多核苷酸链断裂成寡核苷酸链
C.碱基对形成的氢键断裂
D.加入互补RNA链经缓慢冷却后可形成DNA/RNA杂交分子
E.溶液黏度增加
mRNA往往是用各种杂交技术检测的,也就是通过mRNA与单链DNA一起保温,形成DNA-RNA杂交物。有一种技术,把单链DNA吸附在硝酸纤维素滤膜上,加上放射性标记的RNA,然后在导致杂交作用的条件下将混合物保温。游离RNA并不结合到滤膜上,所以滤膜洗涤后所结合的放射性量就是被杂交的RNA量。在某实验中,从感染噬菌体1分钟的细胞中分离出放射性mRNA,然后与分别吸咐在滤膜上的三种不同的DNA分子杂交。DNA分子如图9-3-10所示,其中的数字表示离DNA左侧的距离,相对距离范围为0~100。用野生型噬菌体(Ⅰ)感染细菌。在噬菌体DNA分子Ⅱ和Ⅲ中的阴影区代表噬菌体携带的细菌DNA。接着在两张滤膜上对各类DNA进行杂交试验,吸附有每一类DNA的一张滤膜与核酸酶一起保温(RNase,该酶酶解单链RNA但不酶解杂交的RNA);另一张滤膜不用酶处理(-RNase)。得到的数据如表9-3-10所示。试问mRNA从野生型DNA中的哪个区域转录?
表9-3-10 | ||
滤膜上的DNA | 滤膜上的cpm | |
-RNase | +RNase | |
Ⅰ Ⅱ Ⅲ | 1250 1260 1240 | 1245 418 820 |
在高pH(11.3至11.6,因DNA而异)下,dsDNA转变为ssDNA。若DNA含5-溴尿嘧啶(Bu),则临界pH约为10.5。这种转换可由CsCl离心来检测,因为当DNA转变为单链时,其密度增加0.014g/cm3。正常DNA和Bu-DNA也可在CsCl中加以区分,因为后者密度高于前者密度约0.1g/cm3。过去曾认为,大肠杆菌DNA是四链的,由两条双螺旋通过“biunial键”互相连接。这样,Meselson和Stahl观察所得的杂种密度DNA被认为是一个LL双链与一个HH双链结合而成。为得到杂种DNA,将大肠杆菌在含5-溴尿嘧啶的培养基中培养一代,Robert Baldwin和Eric Shooter就能区别BuLDNA和BuBu:LLDNA(即含BuBu和LL的四链DNA)。试作BuL和BuBu:LL这两种DNA的密度pH的曲线。
A.RNA聚合酶需要引物
B.RNA链的合成方向是5'→3'
C.多数情况下一段双链DNA中只有一股DNA作为指导RNA合成的模板
D.合成的RNA为链状
E.只有在DNA存在时,RNA聚合酶才能催化形成磷酸二酯键