图13-3-5所示的是一段基因组DNA的限制酶图谱以及与其对应的cDNA限制酶谱图。这段基因组DNA中有多少个内含子?
图13-3-5所示的是一段基因组DNA的限制酶图谱以及与其对应的cDNA限制酶谱图。这段基因组DNA中有多少个内含子?它们在哪里?
限制酶简写:B:BamHI;C:ClaI;H:HindⅢ;R:EcoRI;S:SalI;AAA:poly(A)尾。
图13-3-5所示的是一段基因组DNA的限制酶图谱以及与其对应的cDNA限制酶谱图。这段基因组DNA中有多少个内含子?它们在哪里?
限制酶简写:B:BamHI;C:ClaI;H:HindⅢ;R:EcoRI;S:SalI;AAA:poly(A)尾。
假定你获得了一病毒的dsDNA,并全部进行了克隆,并用有限的几种酶对该病毒基因组DNA进行了酶切分析(图Q25.11),图中所示数字的单位是kb。
图Q25.11 假设的某病毒基因组DNA的限制性酶切图谱
人类基因组DNA经过Sau3A(G↓ATC)部分酶切后,连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上 (G↓GATCC)。BamHⅠ位于多克隆位点的SalⅠ和NotⅠ之间,二者距离20 bp。 (1)从文库中分离出某克隆(克隆1),分别用NotⅠ(N)、SalⅠ(S)或SalⅠ十NotⅠ(S十N)酶切后,电泳分离并用EB染色。DNA转移到膜上后,用载体上的DNA作为探针进行杂交,结果如下图所示:
假设同源序列50 bp以下则无杂交信号。在此基因组DNA上标上所有的SalⅠ和NotⅠ位点,标明酶切位点间距离。 (2)从同样的文库中分离到带有重叠片段的克隆(克隆2),用同样的酶切、电泳、转膜后,以克隆1的DNA为探针(包括基因组DNA和载体DNA)进行southern杂交,结果如下图所示:
画出克隆2的图,标明所有SalⅠ和NotⅠ位点及位点间距离。 (3)所有的人类基因组DNA都用SalⅠ酶切,并用来自于克隆1或克隆2的DNA为探针作Southern杂交,结果如下图所示:
其中6个SalⅠ切点的位置可以用以上的结果来确定。请画出这一区域的SalⅠ位点图。
图Q2.7 从一个起点开始的双向复制
(1)复制起点是单个还是多个?
(2)复制是单向还是双向?
来自E.coli的一个编码蛋白的基因的中间一段DNA片段序列如下所示:
5'-C C G G C T A A G C C A T G A C T A G C-3'
3'-G G C C G A T T C G G T A C T G A T C G-5'
如下图所示为基因的非必需部分中的一段DNA。这里只表示拷贝mRNA的那条链(另一条链与此问题无关)。假设,通过吖啶橙的处理,新的序列产生了。两个G从图中所示的点中插入。这将使蛋白质失活,因为阅读框发生了改变。但是,如果在第二个所示位点的G变成c,则会产生活性蛋白。试解释此现象。
Irrelevant part
T C G T A G A G G G G C A A T G A G C A A T A C C C C G C A
阅读方向 插入两个G 突变至C