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[主观题]

用一限制性内切核酸酶切割Lac+Tetr的质粒载体,已知该酶识别的是4个碱基序列,并产生有两个碱基突出的单链末

用一限制性内切核酸酶切割Lac+Tetr的质粒载体,已知该酶识别的是4个碱基序列,并产生有两个碱基突出的单链末端,该酶在lac基因内有切割位点,并在第二个氨基酸密码子内,该位点可以被任何氨基酸所取代而不影响酶活性。用该酶切割后,用DNA聚合酶将单链末端补齐为双链的平末端,然后重新连接成环,转化Lac-Tets受体菌,筛选Tetr转化子,问:Lac的基因型是什么?并说明原因。

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第1题
用限制性内切核酸酶切割载体DNA、供体DNA后,要加入EDTA-SDS终止液使限制性内切核酸酶失活,这样有利于重组连
接。
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第2题
用限制性内切核酸酶Hae Ⅲ分别切割载体DNA和供体DNA后,可用E.coli DNA连接酶进行连接。
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第3题
用限制性内切核酸酶Pst Ⅰ切割质粒pBR322后,再用外切核酸酶Exo Ⅲ进行系列缺失,可得到一系列大小不同的缺失突
变体。
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第4题
用限制性内切核酸酶切割DNA后,经电泳检查,发现有拖尾现象,其可能的原因是什么?
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第5题
用不同的产生黏性末端的限制性内切核酸酶分别切割载体和外源DNA,得到的黏性末端是不亲和的黏性末端。
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第6题
限制性内切核酸酶Bgl Ⅱ识别的序列为A↓GATCT,BamH Ⅰ识别的序列为G↓GATCC,用它们分别切割载体DNA和供体DNA,不
必使酶失活就可以直接通过黏性末端连接法进行连接。
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第7题
EcoR Ⅰ切割载体DNA和供体DNA所产生的片段在用于重组连接前要( )。

A.用65℃处理5~10 min使限制性内切核酸酶失活

B. 用CIP处理载体DNA防止自身环化

C. 进行琼脂糖凝胶电泳检测

D. 上述说法都正确

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第8题
从两个人的血细胞中抽提DNA,并分别用A、B、C三种不同的限制性内切核酸酶进行切割,假定获得一长度为10kb的DNA
酶切图谱(图Q25.10)。发现样品2有点突变,使得B*、C*切割位点丢失。请设计一种实验方案,利用图中所示的DNA区段作为探针,进行指纹和RELP分析。

图Q25.10 10kb片段二种酶切图谱

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第9题
何谓限制性内切核酸酶的切割频率?
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第10题
能识别并切割特异DNA序列的酶称( )

A.限制性外切核酸酶

B.非限制性外切核酸酶

C.限制性内切核酸酶

D.非限制性内切核酸酶

E.DNA酶

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第11题
有人用限制性内切核酸酶EcoR Ⅰ分别切割松弛型质粒ColE1和严紧型质粒pSC101(各有一个切点),然后重组连接形成

有人用限制性内切核酸酶EcoR Ⅰ分别切割松弛型质粒ColE1和严紧型质粒pSC101(各有一个切点),然后重组连接形成一个杂种质粒pSC134,请推测这种质粒有什么特性和用途。

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