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[多选题]
在DNA克隆中，获得目的基因的手段有( )
A.人工化学合成
B.基因组DNA文库
C.mRNA反转录获得的cDNA文库
D.PCR技术
E.以上都不是
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当处理过的细胞分化时，大约25%的细胞转变为肌肉细胞(肌原纤维)，肌原细胞形成的高频率导致一种假说的建立，一个独立的主调控基因，它正常情况下由于甲基化受到抑制，它可以启动完整的转化。估计这个基因在用5'-氮化胞苷处理前是处于关闭状态，而在诱导的肌原细胞中呈开放状态。如果这个设想是真的，在用5'-氮化胞苷处理后的mRNA的cDNA拷贝中应能找到与这个用5'-AzaC处理后就开始启动的基因有关的序列。对策是应用一套放射性探针从正常肌原细胞(这种细胞按照你的设想也能表达这个基因)获得的cDNA文库中挑选可能的cDNA克隆。应准备三种放射性探针：
探针1：从5'-氮化胞苷诱导的肌原细胞中分离RNA，制备含放射性的cDNA探针。
探针2：用5'-AzaC处理的肌原细胞中的有放射性的cDNA与未经处理的10T1/2细胞中的RNA进行杂交，除去所有的RNA和DNA杂合体。
探针3：从正常的肌原细胞中分离RNA，制备放射性DNA探针，然后与未经处理的10T1/2细胞中的RNA杂交，除去所有的RNA和DNA杂合体。
第一个探针同cDNA文库中的大多数克隆发生了杂交，但是这些克隆中只有约1%的克隆与探针2或探针3进行杂交。总之，有四种独特的杂交模式(表13-3-54)。
| 表13-3-54 | |||
| Class | Probe 1 | Probe 2 | Probe 3 |
| A B C D | + + + + | — — + + | — + — + |
A.获得目的基因-重组DNA分子转移如宿主细胞增殖-目的基因与载体基因连接-筛选含重组DNA分子的细胞克隆-扩增目的基因-目的基因表达
B.获得目的基因-目的基因与载体基因连接-重组DNA分子转移如宿主细胞增殖-筛选含重组DNA分子的细胞克隆-扩增目的基因-目的基因表达
C.获得目的基因-目的基因与载体基因连接-重组DNA分子转移如宿主细胞增殖-扩增目的基因-筛选含重组DNA分子的细胞克隆-目的基因表达
D.获得目的基因-目的基因与载体基因连接-筛选含重组DNA分子的细胞克隆-扩增目的基因-目的基因表达-重组DNA
A.但是要制造一头新的猛犸所需的完整的DNA和他的基因蓝图还是有可能的。
B.但是克隆一头猛犸的首要前提是在生物界可能的范围内获得完整的DNA和动物的基因蓝图。
C.但是克隆一头猛犸的先决条件至少已经具备，那就是取得完整的DNA，即这种动物的基因蓝图。
D.但是克隆一头猛犸的先决条件至少已经具备，那就是取得完整的DNA和这种动物的基因蓝图。
利用简单重复序列(SSR)作探针从文库中分离出几个克隆。现在要鉴定与这些重复序列毗邻的单一序列，以期在基因组中建立基于SSR的STS。 (1)如何鉴定分离出的克隆中是否有单一序列？ (2)最有用的STS是那些与人群中存在多态性的SSR相连的STS。如何鉴定一个STS是否与多态性的SSR相连？
根据图12-3-14(A)，画出图12-3-14(B)中所示的同源序列的交换重组产物，在图中，用一条线代表了DNA双链，用箭头代表了同源重组的目的基因。
