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[主观题]

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凝胶色谱法广泛用于测定球形蛋白质相对分子质量,通常用DSEC对分子质量的线性关系作图的方法。求DSEC需知道V0、VR、Vi、V0用很大的分子测量(如燃料蓝色葡萄糖),这个大分子完全被凝胶排出。Vt=Vg+Vi+V0,其中Vt是柱的总体积,根据柱的直径的长度进行计算,Vg为凝胶体积,通常假定是可忽略的。现有(2.5 cm×36 cm)Sephadex G-75柱,测得以下数据:

物质名称

相对分子质量

VR/mL

蓝色葡萄糖

a.醛缩酶

b.卵清蛋白

c.糜蛋白酶A

d.核糖核酸酶A

2000000

158000

45000

25000

13700

53.1

56.0

71.8

82.8

93.0

估算具有VB=76.5mL的蛋白质的相对分子质量。

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