凝胶色谱法广泛用于测定球形蛋白质相对分子质量,通常用DSEC对分子质量的线性关系作图的方法。求DSEC需知道V0
凝胶色谱法广泛用于测定球形蛋白质相对分子质量,通常用DSEC对分子质量的线性关系作图的方法。求DSEC需知道V0、VR、Vi、V0用很大的分子测量(如燃料蓝色葡萄糖),这个大分子完全被凝胶排出。Vt=Vg+Vi+V0,其中Vt是柱的总体积,根据柱的直径的长度进行计算,Vg为凝胶体积,通常假定是可忽略的。现有(2.5 cm×36 cm)Sephadex G-75柱,测得以下数据:
物质名称 | 相对分子质量 | VR/mL |
蓝色葡萄糖 a.醛缩酶 b.卵清蛋白 c.糜蛋白酶A d.核糖核酸酶A | 2000000 158000 45000 25000 13700 | 53.1 56.0 71.8 82.8 93.0 |
估算具有VB=76.5mL的蛋白质的相对分子质量。