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从细菌中分离总DNA,应采取哪些措施获得高分子质量的DNA?

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第1题
爪蟾卵母细胞在卵的发育后期用3H-尿苷同步标记。从卵母细胞中分离的放射性细胞质总RNA与由成体爪蟾提取的且

爪蟾卵母细胞在卵的发育后期用3H-尿苷同步标记。从卵母细胞中分离的放射性细胞质总RNA与由成体爪蟾提取的且呈单链形式结合在滤膜上的DNA进行杂交。该RNA:DNA杂交分子与原肠胚期爪蟾胚胎的非标记细胞质总RNA相竞争。图13-3-68A是假设的结果。在另一相应但相反的实验中,放射性原肠胚期细胞质RNA(原肠胚期胚胎用3H-尿苷标记)与滤膜上的总DNA杂交,该RNA:DNA杂交分子与非标记的后期卵细胞质RNA相竞争,结果如图13-3-68B。

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第2题
由MNNG(亚硝基胍)引起的诱变损伤的本质以及它从DNA上被修复的机制可以用下面的实验来鉴定。为了确定诱变损伤

由MNNG(亚硝基胍)引起的诱变损伤的本质以及它从DNA上被修复的机制可以用下面的实验来鉴定。为了确定诱变损伤的本质,未经处理的细菌和已用低剂量MNNG处理的细菌都在含50μg/ml的3H-MNNG的培养物中培养10min。分离它们的DNA并水解成核苷酸,然后经过纸层析分析放射性的嘌呤,结果如图Q12.2所示:

图Q12.2 层析法分离未被处理和已被低剂量MNNG处理的细菌DNA中被标记的甲基化嘌呤实线表示未被处理细菌DNA中的甲基化嘌呤;虚线表示MNNG处理的细菌所得结果

为了研究诱变损伤切除的机制,首先纯化负责切除的酶,把不同量的酶(相对分子质量19000)和已被3H标记含0.26pmol突变碱基的DNA一起温育,分析切除动力学。在不同时间取样,分析DNA以确定还存在多少突变残基(图Q12.3)。当在5℃而不是37℃时重复这个实验时,虽然最初的切除速率较慢,却得到一样的终点。

图Q12.3纯化的甲基转移酶把3H标记的甲基从DNA上切除所示为纯化酶的量

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第3题
噬菌体DNA进入细菌时,在实验室中通常能再分离到游离DNA,或偶尔与膜的组分结合。在哪个部分能找到f2、R17或MS-

噬菌体DNA进入细菌时,在实验室中通常能再分离到游离DNA,或偶尔与膜的组分结合。在哪个部分能找到f2、R17或MS-2的RNA?

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第4题
mRNA往往是用各种杂交技术检测的,也就是通过mRNA与单链DNA一起保温,形成DNA-RNA杂交物。有一种技术,把单链DN

mRNA往往是用各种杂交技术检测的,也就是通过mRNA与单链DNA一起保温,形成DNA-RNA杂交物。有一种技术,把单链DNA吸附在硝酸纤维素滤膜上,加上放射性标记的RNA,然后在导致杂交作用的条件下将混合物保温。游离RNA并不结合到滤膜上,所以滤膜洗涤后所结合的放射性量就是被杂交的RNA量。在某实验中,从感染噬菌体1分钟的细胞中分离出放射性mRNA,然后与分别吸咐在滤膜上的三种不同的DNA分子杂交。DNA分子如图9-3-10所示,其中的数字表示离DNA左侧的距离,相对距离范围为0~100。用野生型噬菌体(Ⅰ)感染细菌。在噬菌体DNA分子Ⅱ和Ⅲ中的阴影区代表噬菌体携带的细菌DNA。接着在两张滤膜上对各类DNA进行杂交试验,吸附有每一类DNA的一张滤膜与核酸酶一起保温(RNase,该酶酶解单链RNA但不酶解杂交的RNA);另一张滤膜不用酶处理(-RNase)。得到的数据如表9-3-10所示。试问mRNA从野生型DNA中的哪个区域转录?

表9-3-10

滤膜上的DNA滤膜上的cpm
-RNase+RNase

1250

1260

1240

1245

418

820

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第5题
为了构建真核基因组的精确的物理图谱,应选择下列哪些方法:

A.必须分离纯化出个体染色体。

B.DNA必须仅从单倍体细胞(基因组)分离,这可避免由于二倍体细胞中同源染色体的存在而引起的模糊信息。

C.必须进行单个染色体分析,这样的分析仅在细胞分裂后期才有可能进行。

D.必须发现一些在染色体上仅有一个切割位点的限制酶。

E.必须先分离核DNA和细胞器DNA,然后用它们来分析个体的图谱。

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第6题
假定某种噬菌体颗粒含有小的线性单链DNA分子。通过CsCl离心研究它的复制方式。在CsCl中,它的密度是1.714g/cm3

假定某种噬菌体颗粒含有小的线性单链DNA分子。通过CsCl离心研究它的复制方式。在CsCl中,它的密度是1.714g/cm3。含14C标记DNA的噬菌体感染生长在含3H的培养液中的细菌。于不同时间里取样,分离出DNA,对各样品进行离心。所得结果示于图6-3-42。试问这种噬菌体怎样复制它的DNA?你认为子代噬菌体会不会有14C标记?

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第7题
在某真核细胞中分离到大量mRNA。要了解每个细胞中究竟有多少份相应基因的拷贝。为此,通过对细胞总DNA的变性和
复性,得到Cot曲线。在复性不同阶段提取DNA样品,用DNA-RNA杂交测定该基因是否已复性,并用这种方式测得该基因在Cot曲线上的位置。根据大量存在的mRNA,能否预测该DNA在Cot曲线上的位置?试作解释。
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第8题
在其溶洞和裂隙的地层中钻进应采取哪些措施?

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第9题
为了使钢在加热过程中获得细小的奥氏体晶粒度可采取哪些措施?

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第10题
从正常细胞和反转录病毒(不含癌基因)感染的细胞(克隆1)中,分别分离出DNA,用限制酶酶切后做电泳并

从正常细胞和反转录病毒(不含癌基因)感染的细胞(克隆1)中,分别分离出DNA,用限制酶酶切后做电泳并转膜。以某原癌基因的cDNA作探针进行杂交,结果如下图所示:

反转录病毒插入位置在哪里?

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第11题
针对马铃薯甲虫的传播方式与分布情况,可采取哪些检疫措施?参考答案:1.禁止从疫区进口种用马铃薯、对食用马铃薯必须进行严格的检疫检查;2.加强口岸检疫,对来自疫区或途经疫区的各类运输工具及所运载的农副产品,应严格检查其有无附着成虫,薯块中有无匿藏成虫或幼虫。3.加强旅检,特别注意旅客是否带有活成虫标本。4.搞好疫情监测,对疫区周围地区每年都要进行疫情普查和监测,掌握发生动态。

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