现已确定果蝇X染色体中一段DNA的限制酶图谱。成年果蝇的mRNA被分离出来,用电泳分开后,转移到硝酸
指出参与转录的DNA片段以及该片段参与哪个mRNA的转录。内含子、外显子的分布与酶切片段之间有什么联系?
指出参与转录的DNA片段以及该片段参与哪个mRNA的转录。内含子、外显子的分布与酶切片段之间有什么联系?
下表显示的是多种生物中一种虚构酶的基因序列,包括酿酒酵母(S.c.)、曲霉(A.n.)、果蝇(D.m.)、小鼠、大鼠和人类。确定替换位点和沉默位点的突变。在基因演化的基础上,画出该虚构酶的历史发展进化树。
S.c. UUA CCC AGU GAU GAA CAC CGU UUC AAC AUG UAU CUU
A.n. UUA CCC AGU GAC GAA CAU CGC UUC AAC AUG UAU CUC
D.m. UUG CCC AGC GAC GAA CAU CGA UUU AAA AUG UCC AUC
mouse CUG CCU AGG GAC GAA UAU AGA AUU AAG AUG AGU AAG
rat CUG CCU AGG GAC GAA UAU AGG AUU AAG AUG AGU AAG
human CUC CCU AGG GAC GAA UAC AGA AUC AAC AUG AGC GAC
A.必须分离纯化出个体染色体。
B.DNA必须仅从单倍体细胞(基因组)分离,这可避免由于二倍体细胞中同源染色体的存在而引起的模糊信息。
C.必须进行单个染色体分析,这样的分析仅在细胞分裂后期才有可能进行。
D.必须发现一些在染色体上仅有一个切割位点的限制酶。
E.必须先分离核DNA和细胞器DNA,然后用它们来分析个体的图谱。
四膜虫(Tetrahymena)是一种有两个胞核的有纤毛原生动物,小胞核(micronucleus)具有细胞染色体的主拷贝,其参与有性接合,但不参与日常基因的表达。大胞核(macronucleus)是一种由很多大小基因双链DNA片段形成的细胞基因组的“工作”拷贝(小染色体-minichromosomes),其参与基因转录,小染色体的许多拷贝中都有核糖体RNA的基因。可用梯度离心将其与其他小染色体分离,以进行进一步的研究。
通过电镜检测发现每个含核糖体基因小染色体为线性结构,长21kb。用琼脂糖凝胶电泳观察其仍为21kb(图16-3-24,泳道1)。如果用限制酶BglⅡ酶切小染色体,产生的两个片段13.4和3.8kb加起来不到21kb(图16-3-24,泳道2)。用其他限制酶酶切DNA,所得片段大小加起来仍旧不足21kb,而且每一种消化所产生的片段大小之和均不同。
如果未切割的小染色体在跑电泳之前先经过变性退火,那么21kb片段将被切割成正好是其一半的10.5kb。用双链片段代替(图16-3-24,泳道3),相似地,如果BglⅡ切割过的小染色体经变性和退火,则13.4kb片段将被其一半大小的6.7kb双链片段代替(图16-3-24,泳道4)。
请解释为什么限制酶切割下的片段加起来不是21kb?为什么经变性退火后其电泳形式就发生改变?你认为核糖体小染色体的序列是什么样的?
假设你在研究5个果蝇近缘种的细胞遗传学。下图给出5种果蝇相同基因座(a,b,c,d,e,f,k,l,m,x,y,z)的排列和染色体的模式图。试推测每一种果蝇是如何演化成另外一种的。(注意仔细比对基因顺序,o表示着丝粒。)