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欲克隆一长2 kb 的cDNA,哪些载体合适?哪些不合适?为什么?

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第1题
如何寻找差异表达的cDNA克隆?

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第2题
从cDNA文库中随机检出成千上万的克隆,单边测序后产生的cDNA标记称为_________。

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第3题
在cDNA文库中,分离到两个不同的cDNA克隆,都可以与神经生长因子探针杂交。两个克隆开始区和终止区
序列相同,中间的序列不同。如何解释这个结果?

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第4题
候选克隆法克隆基因的步骤有()

A.通过DNA连锁分析确定待分离基因在染色体上的大概位置

B.进行分子杂交,定位基因在染色体上的具体位置

C.研究该区域内的已知基因、ORF、EST或cDNA片段,确定进一步研究对象

D.通过cDNA筛选、外显子捕获或物理捕获法在该区域内寻找和鉴定基因

E.对找到的“基因”的核苷酸序列进行分析,推测其功能

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第5题
人类基因组DNA经过Sau3A(G↓ATC)部分酶切后,连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上 (G↓GATCC)。BamHⅠ位于

人类基因组DNA经过Sau3A(G↓ATC)部分酶切后,连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上 (G↓GATCC)。BamHⅠ位于多克隆位点的SalⅠ和NotⅠ之间,二者距离20 bp。 (1)从文库中分离出某克隆(克隆1),分别用NotⅠ(N)、SalⅠ(S)或SalⅠ十NotⅠ(S十N)酶切后,电泳分离并用EB染色。DNA转移到膜上后,用载体上的DNA作为探针进行杂交,结果如下图所示:

假设同源序列50 bp以下则无杂交信号。在此基因组DNA上标上所有的SalⅠ和NotⅠ位点,标明酶切位点间距离。 (2)从同样的文库中分离到带有重叠片段的克隆(克隆2),用同样的酶切、电泳、转膜后,以克隆1的DNA为探针(包括基因组DNA和载体DNA)进行southern杂交,结果如下图所示:

画出克隆2的图,标明所有SalⅠ和NotⅠ位点及位点间距离。 (3)所有的人类基因组DNA都用SalⅠ酶切,并用来自于克隆1或克隆2的DNA为探针作Southern杂交,结果如下图所示:

其中6个SalⅠ切点的位置可以用以上的结果来确定。请画出这一区域的SalⅠ位点图。

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第6题
克隆载体(clone vecter)

克隆载体(clone vecter)

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第7题
关于基因工程的内容或步骤,正确的是()。

A.获得目的基因-重组DNA分子转移如宿主细胞增殖-目的基因与载体基因连接-筛选含重组DNA分子的细胞克隆-扩增目的基因-目的基因表达

B.获得目的基因-目的基因与载体基因连接-重组DNA分子转移如宿主细胞增殖-筛选含重组DNA分子的细胞克隆-扩增目的基因-目的基因表达

C.获得目的基因-目的基因与载体基因连接-重组DNA分子转移如宿主细胞增殖-扩增目的基因-筛选含重组DNA分子的细胞克隆-目的基因表达

D.获得目的基因-目的基因与载体基因连接-筛选含重组DNA分子的细胞克隆-扩增目的基因-目的基因表达-重组DNA

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第8题
外源基因克隆入一个合适载体,首先导入体外培养细胞筛选后将能表达外源基因的受体细胞重新回输受试者体内称()

A.直接活体转移

B.回体转移

C.间体转移

D.导入

E.移植

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第9题
下列限制酶哪个或哪些可以准确切割下一段cDNA?这段cDNA可以编码多肽KIGPACF(N代表任一种核苷酸)。 限制酶

下列限制酶哪个或哪些可以准确切割下一段cDNA?这段cDNA可以编码多肽KIGPACF(N代表任一种核苷酸)。

限制酶 识别序列

AluI AGCT

Sau96I GGNCC

HindⅢ AAGCTT

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第10题
用HindⅢ消化鼠的基因组,用某探针获得一个简单的RFLP,包含1.7 kb和3.8 kb两个片段。一个弯尾的杂合
体老鼠,用以上方法获得的RFLP也是杂合体。该鼠与一个只显示3.8 kb片段的野生型老鼠杂交,40%的弯尾后代是3.8 kb等位基因的纯合体,60%是3.8 kb和1.7 kb的杂合体。 (1)如果弯尾基因和RFLP连锁,画出亲代和子代的染色体。 (2)在野生型后代中,预测会有怎样的RFLP类型?比例如何?

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第11题
序列位置标签(STS)是一段短的DNA序列,通常是指()。

A.人类基因组中长约200-600bp的单拷贝片段

B.人类基因组中2—6bp呈串联重复的DNA序列

C.人类基因组小长约150—400bp的cDNA文库表达序列

D.两顺序相同的互补序列在同一条DNA链上相反方向排列构成反倒位重复

E.两顺序相同的互补序列在同一条DNA链上相同方向排列构成倒位重复

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