λ阻抑蛋白是一种DNA结合蛋白,它属于以下哪一种?( )
A.螺旋-环-螺旋蛋白
B. 螺旋-转角-螺旋蛋白
C. 锌指蛋白
D. 亮氨酸拉链蛋白
E. DNA脱甲基化酶
A.螺旋-环-螺旋蛋白
B. 螺旋-转角-螺旋蛋白
C. 锌指蛋白
D. 亮氨酸拉链蛋白
E. DNA脱甲基化酶
A.阻断聚合酶在操纵子上的经过位点
B.形成茎环结构阻断聚合酶的通过
C.物理阻断聚合酶分子上的DNA结合位点
D.通过结合聚合酶分子,从而阻止其结合
T4噬菌体能编码一种与单链DNA结合的蛋白(即SSB蛋白)。SSB蛋白对于重组和DNA的复制相当重要,编码SSB蛋白的基因部位产生的温度敏感突变T4突变体在温度升高时,能迅速地停止重组和DNA复制。T4的SSB蛋白是一个分子量为35000U的伸长的单体蛋白,它能紧密结合单链DNA,而不能结合双链DNA。在DNA与蛋白质量达到1:12时结合达到饱和。然而,图12-3-16表明,SSB蛋白结合DNA有一个特殊的性质。在10μg过量单链DNA存在下,有0.5μgSSB蛋白质时实际上没有结合,而在7.0μgSSB蛋白质存在时,可观察到几乎所有定量的结合。
由酵母交配型基因座产生的关键调控蛋白之一是一个抑制蛋白,称做α2。在可交配型的单倍体细胞中,α2对于关闭一系列涉及到交配型特异性的基因是必需的。在α2二倍体细胞中,α2抑制物同α1基因产物协同作用,关闭了除α特异性基因外的一系列单倍体特异性的基因。两类有区别又相互关联的保守DNA序列在这两套控制基因的上游被发现,一个在单倍体特异性基因前,另一个在α特异性基因前。根据这些上游序列的相关性,很有可能α2与两者都结合。然而,它的结合特性在它能识别单倍体特异性基因前必须通过α1蛋白以某种方式进行修饰。至此,这种修饰作用的本质是什么?α1是能催化α2的共价修饰,还是能与α2结合而修饰α2蛋白?
为了认清这些问题,要做三个实验。首先,在单独作用和共同作用两种方式下,测定α1和α2与两种上游调控DNA位点的结合(图13-3-50所示)。α1单独不能同含有任何调控位点的DNA片段结合。然而α2虽能与α专一性片段结合,但是不能同单倍体专一性片段结合。α1和α2的混合物同两者都能结合。
在第二个实验中,大量的含α专一性序列的未标记DNA加入到α1和α2蛋白的混合物中。在这样的条件下,单倍体专一性片段仍被束缚。同样,如果加入过量的含有单倍体专一性片段的未标记DNA到混合物中,α专一性片段仍然被束缚。
在第三个实验中,改变不同的α1和α2的比例,当α2过量时,同单倍体专一性片段的结合减弱,而当α1过量时,同α专一性片段的结合减弱。
噬菌体T4编码一个对重组和DNA复制很重要的单链DNA结合蛋白(SSB蛋白)。含有编码SSB蛋白温度敏感型基因的噬菌体T4突变体在升高温度时会快速地终止重组和DNA复制。噬菌体T4 SSB蛋白是分子质量为35 000Da的单体蛋白,它和单链而不是双链DNA紧密结合,结合体中DNA与蛋白质的重量比为1:12。然而SSB蛋白和DNA的结合显示出一个很特别的性质,如图Q13.4所示。当单链DNA过量时(10μg),而SSB蛋白为0.5μg时则完全检测不到结合体[图Q13.4(a)],然而当SSB蛋白为7.0μg时,可以看见许多二者的结合体[图Q13.4(b)]。
图Q13.4噬菌体T4 SSB蛋白与单链DNA的结合通过蔗糖梯度离心分析,发现DNA较蛋白质重得多,沉得快,因此更靠近梯度的底部