滚环复制在缺口(gap)上起始。假定聚合酶Ⅲ是复制酶,试讨论聚合酶Ⅲ在能够起始聚合作用之前必定发生的几件事。
假定某种噬菌体颗粒含有小的线性单链DNA分子。通过CsCl离心研究它的复制方式。在CsCl中,它的密度是1.714g/cm3。含14C标记DNA的噬菌体感染生长在含3H的培养液中的细菌。于不同时间里取样,分离出DNA,对各样品进行离心。所得结果示于图6-3-42。试问这种噬菌体怎样复制它的DNA?你认为子代噬菌体会不会有14C标记?
在高pH(11.3至11.6,因DNA而异)下,dsDNA转变为ssDNA。若DNA含5-溴尿嘧啶(Bu),则临界pH约为10.5。这种转换可由CsCl离心来检测,因为当DNA转变为单链时,其密度增加0.014g/cm3。正常DNA和Bu-DNA也可在CsCl中加以区分,因为后者密度高于前者密度约0.1g/cm3。过去曾认为,大肠杆菌DNA是四链的,由两条双螺旋通过“biunial键”互相连接。这样,Meselson和Stahl观察所得的杂种密度DNA被认为是一个LL双链与一个HH双链结合而成。为得到杂种DNA,将大肠杆菌在含5-溴尿嘧啶的培养基中培养一代,Robert Baldwin和Eric Shooter就能区别BuLDNA和BuBu:LLDNA(即含BuBu和LL的四链DNA)。试作BuL和BuBu:LL这两种DNA的密度pH的曲线。