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[单选题]
分离和纯化蛋白质的基本方法是______。
A.可逆沉淀
B.不可逆沉淀
C.抗体—抗原沉淀
D.蛋白质变性沉淀
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A.可逆沉淀
B.不可逆沉淀
C.抗体—抗原沉淀
D.蛋白质变性沉淀
适用于蛋白质的分离纯化,但不至于使其变性的方法为
A.醇提水沉法
B.盐析法
C.酸碱法
D.水提醇沉法
E.离心分离法
SH3区约由60个氨基酸组成,存在于许多不同的蛋白质中——包括非受体酪氨酸激酶的Src、Abl和Sem5,Scm5是线虫信号转导中的小接头蛋白。同SH2一样,SH3区可识别并结合其他蛋白质中的结构基序。
为鉴定出与SH3区结合的结构基序,可构建SH3的氨基酸顺序区域与谷光甘肽-S转移酶(GST)的融合蛋白,从而可在细菌中得到大量的融合蛋白。你要用纯化的生物素标记GST-SH3融合蛋白,从E.coli表达的cDNA文库中筛选(用生物素标记的GST-SH3融合蛋白检测固定在虑膜上的能与它相互作用的蛋白的方法灵敏度高)。为了作一对照,可用生物素标记GST来同时探测两张同样的膜。
从文库中筛选分离到两个不同的克隆,分别命名为3BP-1、3BP-2,进一步的分析证明这些克隆均编码与SH3区结合的蛋白质,且这些蛋白质与SH3结合的区域是在一富含脯氨酸的短序列内。
①35S不会出现在子代噬菌体中。
②32P总是出现在几个子代的噬菌体中,但是每个噬菌体中的含量比亲代噬菌体颗粒中的含量少得多。35S不出现在噬菌体颗粒中。
③32P只出现在一或二代的噬菌体颗粒中,并只出现在一条DNA链上。35S出现在许多子代在噬菌体中,每个噬菌体的含量比亲代噬菌体颗粒中的含量少得多。