载体蛋白可以看作是结合在生物膜上的酶,但下列有关载体蛋白与酶的比较错误的是:
A.都有特异的结合位点,可同特异的底物(溶质)结合
B.载体蛋白转运过程具有类似于酶与底物作用的饱和动力学曲线
C.都可以被底物类似物竞争性抑制,都有对pH的依赖性
D.都能改变反应平衡点,加快物质沿自由能减少的方向跨膜运动的速率
A.都有特异的结合位点,可同特异的底物(溶质)结合
B.载体蛋白转运过程具有类似于酶与底物作用的饱和动力学曲线
C.都可以被底物类似物竞争性抑制,都有对pH的依赖性
D.都能改变反应平衡点,加快物质沿自由能减少的方向跨膜运动的速率
A.整个酶分子的中心部位
B.酶蛋白与辅酶结合的部位
C.酶发挥催化作用的部位
D.酶分子表面具有解离基团的部位
E.酶的必需基团在空间结构上集中形成的一个区域,能与特定的底物结合并使之转化成产物的部位
A.需要蛋白C末端的信号序列和移位酶上的ATP结合框。
B.需要一个N末端信号序列和Sec蛋白如SecA(为蛋白在移位酶上定位所需的一个水解ATP的外周膜蛋白)。
C.需要转位过程中质子活动的动力。
D.蛋白间相互作用不牵涉识别信号序列。
E.需要热休克蛋白70家族分子伴侣的作用。
你在一种高效的克隆载体λYES(酵母一大肠杆菌中穿梭)中构建了一个cDNA文库,这种载体是由细菌噬菌体λ基因和一种可在大肠杆菌和酵母中复制的质粒重组而成,它结合了病毒和质粒克隆载体的优点。cDNA可以插入到载体的质粒部分,这样就可以在体外被包装进一个病毒衣壳,包装后的载体感染E.coli比质粒自身更有效,一旦进入E.coli,在λYES中的质粒序列可诱导脱离λ基因组进行重组并可自我复制,这就使cDNA在质粒上与λ分离,这就有利于以后的操作。
为了使克隆效率最大,载体和cDNA均用特殊的方法加以制备,在载体DNA单一独特的XhoI位点切割(5'-CTCGAG)后在dTTP存在下与DNA多聚酶一起孵育,一个制备好的钝端cDNA与一个双链寡核苷酸接头连接,这个接头由两个寡核苷酸5'-CGAGATTTACC和5'-GGTAAATC组成,其5'-末端均有磷酸基团,然后DNA和cDNA混匀并进行连接。这个方案证实非常有效,用2μg载体和0.1mg cDNA,你可以得到4×107重组分子组成的文库。
大肠杆菌阿拉伯糖的代谢调控相当复杂,不仅仅是相关基因在染色体上分散排列(如图13-3-38所示),还有调控蛋白。AraC既是正调控因子又是负调控因子,例如,在araBAD基因簇的调控中(图13-3-41A),当阿拉伯糖存在时(无葡萄糖),与位点1结合的AraC蛋白可使转录比缺乏AraC蛋白的基本转录水平增强100倍。在缺乏阿拉伯糖时与位点2结合的AraC蛋白抑制araBAD基因的转录,与缺乏AraC蛋白的基础转录水平相比较大,约相差10倍。在位点2的负调控和位点1的正调控的综合作用下意味着阿拉伯糖的加入导致arcBAD基因簇转录将提高1000倍。
在位点1处结合的正调控看来是直接的,因为这个位点位于启动子附近,估计使RNA聚合酶更容易结合或激活转录起始复合物。在位点2的结合会使你更加迷惑,位点2位于转录起始点上游270核苷酸处,这样远距离的调控作用更容易使人联想到真核细胞中的增强子。为了更容易地了解位点2的抑制机制,移动整个调控区把它置于grlK基因前,这个基因编码半乳糖激酶,比araBAD基因簇编码的酶更容易分析研究。
为了确定两个araC结合位点间区域的重要性,可按图13-3-41A所示的那样在插入点插入或缺失一段核苷酸。在缺乏阿拉伯糖时启动子的活性研究是通过将细菌在特殊指示平板上进行培养来实践的,如果启动了,活性被完全抑制,菌落是白色的,如果半乳糖激酶产生,则菌落为红色,然后对照着在两个结合位点间的序列插入或缺失多少个核苷酸的图示上(图13-3-41B),画线培养相应的细菌突变体,结果发现,红线和白线是相互散置的。
这些实验结果可以区别三种远距离抑制的潜在机制。
(1)DNA结构上的改变可以使抑制位点向转录位点分散,使启动子不适合RNA聚合酶的结合。
(2)蛋白可以在抑制位点以这样的方式协作,即附加因子不断加入,产生连锁反应,覆盖了整个启动子,由此封闭了转录过程。
(3)DNA可成环以致于蛋白在很远处的抑制位点与DNA结合就可影响转录起始点的蛋白(或DNA)。
你所得的结果证实了哪一种机制,如何解释红色及白色的条纹?
DNA依赖的RNA聚合酶的通读可以通过()。
A.ρ因子蛋白与核心酶的结合
B.抗终止蛋白与一个内在的ρ因子终止位点结合,因而封闭了终止信号
C.抗终止蛋白以它的作用位点与核心酶结合,因而改变其构象,使终止信号不能被核心酶识别
D.NusA蛋白与核心酶的结合
E.聚合酶跨越抗终止蛋白-终止子复合物
A.变构体与酶分子上的非催化部位结合
B. 使酶蛋白构象发生变化,从而改变酶结构
C. 酶分子多有调节亚基和催化亚基
D. 变构调节都产生正调节,即加快反应速度
E. 变构调节都产生负效应,即降低反应速度
氟康唑
A.干扰核酸和蛋白合成
B.选择性抑制真菌甾醇-14Α-去甲基酶
C.抑制角鲨烯环氧化酶
D.结合真菌细胞膜上麦角固醇,破坏细胞膜屏障