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Cohen等构建的第一个有功能的重组DNA分子是在()。
A．1973年
B．1970年
C．1980年
D．1975年
有个设想是拼接体结合在内含子一端的第一个拼接位点上，然后扫过整个内含子寻找位于另一端的第二个拼接位点。这种机制能够保证外显子不被略过。你想验证这个假说，于是构建了两个微基因：一个有双倍的5'拼接位点，另一个有双倍的3'拼接位点(图8-3-33)，把这些微基因转入细胞，分析其RNA产物，看在拼接中使用了哪个5'和3'位点。
你在一种高效的克隆载体λYES(酵母一大肠杆菌中穿梭)中构建了一个cDNA文库，这种载体是由细菌噬菌体λ基因和一种可在大肠杆菌和酵母中复制的质粒重组而成，它结合了病毒和质粒克隆载体的优点。cDNA可以插入到载体的质粒部分，这样就可以在体外被包装进一个病毒衣壳，包装后的载体感染E.coli比质粒自身更有效，一旦进入E.coli，在λYES中的质粒序列可诱导脱离λ基因组进行重组并可自我复制，这就使cDNA在质粒上与λ分离，这就有利于以后的操作。
为了使克隆效率最大，载体和cDNA均用特殊的方法加以制备，在载体DNA单一独特的XhoI位点切割(5'-CTCGAG)后在dTTP存在下与DNA多聚酶一起孵育，一个制备好的钝端cDNA与一个双链寡核苷酸接头连接，这个接头由两个寡核苷酸5'-CGAGATTTACC和5'-GGTAAATC组成，其5'-末端均有磷酸基团，然后DNA和cDNA混匀并进行连接。这个方案证实非常有效，用2μg载体和0.1mg cDNA，你可以得到4×107重组分子组成的文库。
在真核生物中，双链DNA的交换是一种普遍的现象(如在减数分裂过程中的双交换)。而在单倍体的原核生物中，双链DNA的重组性交换是很少见的。
