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[单选题]

以EcoR Ⅰ分别酶切载体和片段DNA,重新连接前要进行下列哪些操作( )

A.65℃处理5~10分钟,使EcoR Ⅰ失活

B.CIP处理载体DNA,防止自身环化

C.琼脂糖凝胶电泳检测

D.A+B+C

E.A+C

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第1题
某双链DNA,以32P标记5’端,然后分别用EcoRⅠ和BamHⅠ酶切,得到下列长短的片段(单位为kb),*表示带标

某双链DNA,以32P标记5’端,然后分别用EcoRⅠ和BamHⅠ酶切,得到下列长短的片段(单位为kb),*表示带标记片段。 EcoRⅠ:2.8、4.6、6.2 *、7.4、8.0 * BamHⅠ:6.0 *、10.0 *、1 3.0 如果不带标记的DNA用两种酶同时切割,会得到下列片段:1.0,2.0,2.8,3.6,6.0,6.2,7.4。 两种酶的酶切图谱是什么?

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第2题
某DNA片段含有4个EcoRⅠ酶切位点: 上述DNA片段存在若干突变体,这些突变体用同种酶完全

某DNA片段含有4个EcoRⅠ酶切位点:

上述DNA片段存在若干突变体,这些突变体用同种酶完全酶切,电泳后结果如图所示,其中*代表带有标记的片段。可否确定发生了何种突变?

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第3题
人类的一段DNA片段一端为E∞R工位点,另一端为HindⅢ位点。用32P标记EcoRⅠ一端,然后用HauⅠ或Sau3A部
分酶切,进行电泳。放射自显影结果如图:

(1)EcoRⅠ到HindⅢ位点间的片段有多大? (2)画出HhaⅠ和Sau3A的酶切位点。 (3)标记有32p的同样DNA片段,用HhaⅠ完全酶切,进行电泳,那么用EB染色或放射自显影,会分别得到什么样的图?

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第4题
将下列对应部分连线 a.寡核苷酸 ①用作运载、复制和纯化DNA片段的DNA.分子 b.载体
②收集某物种的DNA片段,再插入载体 c.黏性末端 ③由反转录酶以RNA为模板复制出的DNA拷贝 d.重组DNA ④单链DNA间相互稳定地结合 e.反转录 ⑤扩增DNA片段的快速而有效的手段 f.基因组文库 ⑥推断某段多肽的氨基酸序列所对应的核苷酸序列的方法 g.基因组平衡 ⑦含有从两个不同物种而来的遗传物质 h.cDNA ⑧含有某物种整个基因组的一组DNA片段 i.PCR ⑨存在于许多限制酶酶切片段末端的单链DNA序列 j.杂交 ⑩可用机器合成的短DNA片段

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第5题
Fredrick和McClarin等用一个由13个碱基对的DNA片段与EcoR Ⅰ反应,然后分离到酶和DNA共结晶的复合物,通过X射

线分析发现了什么?

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第6题
人类基因组DNA经过Sau3A(G↓ATC)部分酶切后,连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上 (G↓GATCC)。BamHⅠ位于

人类基因组DNA经过Sau3A(G↓ATC)部分酶切后,连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上 (G↓GATCC)。BamHⅠ位于多克隆位点的SalⅠ和NotⅠ之间,二者距离20 bp。 (1)从文库中分离出某克隆(克隆1),分别用NotⅠ(N)、SalⅠ(S)或SalⅠ十NotⅠ(S十N)酶切后,电泳分离并用EB染色。DNA转移到膜上后,用载体上的DNA作为探针进行杂交,结果如下图所示:

假设同源序列50 bp以下则无杂交信号。在此基因组DNA上标上所有的SalⅠ和NotⅠ位点,标明酶切位点间距离。 (2)从同样的文库中分离到带有重叠片段的克隆(克隆2),用同样的酶切、电泳、转膜后,以克隆1的DNA为探针(包括基因组DNA和载体DNA)进行southern杂交,结果如下图所示:

画出克隆2的图,标明所有SalⅠ和NotⅠ位点及位点间距离。 (3)所有的人类基因组DNA都用SalⅠ酶切,并用来自于克隆1或克隆2的DNA为探针作Southern杂交,结果如下图所示:

其中6个SalⅠ切点的位置可以用以上的结果来确定。请画出这一区域的SalⅠ位点图。

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第7题
具有EcoR Ⅱ末端的外源片段可以以两个方向插入到EcoR Ⅱ末端的载体中。
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第8题
从原位杂交结果知道,5个含有基因组片段的YAC(A~E)杂交到人类基因组某染色体的一条特异的带上。基

从原位杂交结果知道,5个含有基因组片段的YAC(A~E)杂交到人类基因组某染色体的一条特异的带上。基因组DNA被切点稀有的限制性内切酶消化后的产物分别与5个放射性标记的YAC杂交,放射自显影结果如下:

(1)3条限制性酶切条带的顺序如何? (2)分别给出5个YAC与3个酶切片段的相对位置。

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第9题
入噬菌体的线性基因组DNA两端各有一段20个碱基长的单链突出,它们是可以互补的黏性末端,可以连接
起来,使DNA环化。在试管中分别对线性和环状DNA进行限制酶切割 (EcoRⅠ、BarnHⅠ或同时用二者),结果如下页图所示: (1)哪个样品是环状DNA分子? (2)线形DNA总长度是多少? (3)环状DNA的总长度是多少? (4)画出线形DNA的限制酶酶切图谱,标明EcoRⅠ和BamHⅠ所有位点。

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第10题
在对酵母两个单倍体群体的研究中,探针A和B被用于探测RFLP。群体1中,基因A产生形态A1,基因B产生形
态B1。群体2中,基因A产生形态A2,基因B产生形态B2。这些形态可用探针结合的HindⅢ酶切片段来区别:

检测减数分裂产物。下表给出了每种类型分别与探针A和B杂交的DNA片段:

(1)这些不同孢子DNA如何产生? (2)画出对应的染色体区域。

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第11题
具有EcoR Ⅱ末端的外源片段只能以一个方向插入到EcoR Ⅱ末端的载体中。
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