滚环复制( )。
A.是细菌DNA的主要复制方式
B. 可以使复制子大量扩增
C. 产生的复制子总是双链环状拷贝
D. 是噬菌体DNA在细菌中最通常的一种复制方式
E. 复制子中编码切口蛋白的基因的表达是自动调节的
A.是细菌DNA的主要复制方式
B. 可以使复制子大量扩增
C. 产生的复制子总是双链环状拷贝
D. 是噬菌体DNA在细菌中最通常的一种复制方式
E. 复制子中编码切口蛋白的基因的表达是自动调节的
A.M13K07能够进行滚环复制,得到大量的单链噬菌体DNA
B. M13K07能够提供成熟包装的蛋白质
C. M13K07提供了成熟包装所需的信号
D. M13K07的10个基因都是正常的
滚环复制在缺口(gap)上起始。假定聚合酶Ⅲ是复制酶,试讨论聚合酶Ⅲ在能够起始聚合作用之前必定发生的几件事。
涉DNA复制直接移动。你的想法是根据这两种机制的主要不同点:如果不复制,那么转座子的两条亲链将同时移动;如果复制,则只有一条亲链移动。你打算把来自两个不同Tn10的链经退火后都标记上。为了把这些杂种Tn10双螺旋足够地分配到细胞中。你用了含有Tn10的λ噬菌体DNA,它既能在体外操作又能包在病毒壳内成为有侵染力的噬菌体。你决定使用一个因为其他突变而失去活性的噬菌体基因组,因此它就不会复制整合,而且最终可被除去,这样噬菌体基因组可被忽略。你的噬菌体DNA在同样位点插入了稍微不同的Tn10。两种Tn10都含有四环素抗性基因和乳糖代谢基因(lacZ),但其中一种由于突变使lacZ基因失活。这种差异为追踪两种Tn10提供了一个很方便的方法,
转座因子被示为一条杂合双链,由两条遗传上不同的链组成——一条白色、一条黑色。在复制转座期间,一条链与供体DNA留在一起,一条被转向受体DNA;在非复制转座时,转座子被从供体DNA上切下,全部转到受体DNA上因为lacZ+细菌克隆(与适当的底物共育时)会变蓝,而lacZ-克隆则还是白色。你把两种噬菌体DNA的混合物变性后退火,得到两份相等的杂交双链与纯合双链的混合物。然后你将混合物包装到噬菌体外壳中,侵染lacZ-细菌,并把被侵染细菌涂布在含四环素和可产生有色底物的平板上。一旦噬菌体DNA进入了细菌,转座子将进入细菌基因组(频率很低),给细菌带来四环素抗性。获得一个Tn10的稀有野生细菌,可以在选择条件下生存并形成克隆。统计大量这样的克隆会发现有25%为白色,25%为蓝色,50%为蓝色部分与白色部分的混合物。