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[多选题]

DNA杂交是用于检测样品中特殊DNA序列的技术,此技术的基础是基于()。

A.DNA双链

B.DNA大沟和小沟

C.DNA变性-复性特性

D.DNA序列特异性

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第1题
当载有文库的菌落被转移到杂交膜上用于筛选时,需要碱性溶液处理的步骤,这一步骤的意义何在?( )

A.促使文库DNA结合到杂交膜上

B. 启动杂交探针与互补序列间的反应

C. 标记DNA,便于检测

D. 刺激DNA复制,增加质粒拷贝数

E. 裂解菌体细胞,并使DNA变性

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第2题
克隆的进行依赖于各种参与DNA新陈代谢的______的使用,它们主要是从原核细胞中分离的。______能够将DNA切割成
特定大小的片段。各种各样的DNA聚合酶也是克隆所必需的,包括将RNA转录出单链DNA的______。DNA______用于连接限制性片段。克隆也需要来源于微生物的DNA序列,包括用来运载被______克隆载体。质粒载体来源于天然细菌质粒,通常携带有______抗性基因。其他载体来源于噬菌体,如λ噬菌体,它们经过修饰后可以运输外源DNA。要想克隆一个感兴趣的真核生物的基因就必须先制作一个能与该基因杂交的______。人们已经发展了很多有效而精细的技术来分析克隆的DNA。例如,极微量的DNA片段可以通过______得到扩增。在感兴趣基因的启动子上连接,如______或______之类的______基因能够定量检测基因的活性。
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第3题
用DNA探针同RNA分子杂交在测定一已知基因在某一细胞中是否表达时是很有用的,但不能用于检测转录起始位点、终
止位点或内含子的位置。
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第4题
引物延伸法是检测SNP的方法,操作步骤从准备样品和试剂开始,将下列步骤排序。 a.样品DNA变性
b.加入DNA聚合酶和一种脱氧核苷三磷酸 c.从SNP毗邻区设计一个寡聚核苷酸引物 d.进行引物和扩增后DNA样品的杂交 e.从受试者分离基因组样品 f.用高通量光谱法分析产物 g.用PCR扩增SNP区域

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第5题
许多引起人类遗传病的突变都是由单个核苷酸的取代而造成的。寡聚核苷酸的连接作用可提供一个快速检测单个核
苷酸差异的手段。这种分析方法要使用成对的寡聚核苷酸:其中一个被生物素标记,另一个具有放射性标记或荧光标记。图Q25.5(b)的一对寡聚核苷酸是为了检测镰状细胞白血病[图Q25.5(a)]而设计的。

在分析过程中,分别将不同个体的DNA在有DNA连接酶的存在下,两两配对进行寡聚核苷酸杂交。将生物素酰化的寡聚核苷酸结合到固相支持物的抗生物素链霉蛋白上,然后通过放射自显影检查杂交结果,如图Q25.5(c)所示。

图Q25.5寡聚核苷酸连接分析(a)β-珠蛋白基因的β镰状细胞(βS)突变区的序列;(b)用于连接分忻的特异性的寡聚核苷酸;(c)βAβS之间单个碱基差异的检测分析,将生物素酰化的寡聚核苷酸收集在一个点,然后测定放射性

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第6题
用DNA探针进行杂交反应非常敏感并具有选择性,可用来测定某一特定DNA序列在细胞基因组中的拷贝数。
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第7题
RNA与基因组DNA的杂交已被广泛用于检测不同类DNA的转录。用DNA-drivenassociation experiment和用RNA进行的
复性实验有什么区别?
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第8题
为了确定哪些DNA序列被转录成RNA而进行“追踪”实验。在该实验中:

A.大量未标记的RNA与限量的基因组DNA杂交。

B.少量标记的RNA与过量的基因组DNA杂交。

C.过量的DNA足够使所有被标记的RNA被杂交。

D.跟踪者RNA与转录得到它的DNA簇重新结合。

E.大多数的追踪RNA与中等重复序列杂交。

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第9题
在对酵母两个单倍体群体的研究中,探针A和B被用于探测RFLP。群体1中,基因A产生形态A1,基因B产生形
态B1。群体2中,基因A产生形态A2,基因B产生形态B2。这些形态可用探针结合的HindⅢ酶切片段来区别:

检测减数分裂产物。下表给出了每种类型分别与探针A和B杂交的DNA片段:

(1)这些不同孢子DNA如何产生? (2)画出对应的染色体区域。

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第10题
把放射性(14C)尿嘧啶加入到某种细菌的生长培养物中10s,再加入利福平。每隔2min取样1ml,置于冰浴中。把细菌裂

把放射性(14C)尿嘧啶加入到某种细菌的生长培养物中10s,再加入利福平。每隔2min取样1ml,置于冰浴中。把细菌裂解,并加入DNase,消化一小时确保DNA消化完全。然后每份样品分为两部分。一份用于沉降,另一份与带有细菌cla基因的噬菌体DNA杂交。数据列在下表中。将数据用半对数纸作图,并假定mRNA是一级衰变。

时间(min)配可沉淀物的放射活性

(cpm)

可杂交的放射活性

(cpm)

t=0

t=2

t=4

t=6

t=8

t=10

t=12

t=14

t=16

t=18

50240

35050

27510

23 725

-21850

20920

20460

20230

20110

20100

1820

1375

1060

918

720

561

431

310

248

210

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第11题
从基因诊断的发展史来看,具有代表性的分子生物学技术有( )

A.核酸分子杂交

B.PCR

C.限制性酶切图谱分析

D.DNA序列测定

E.DNA芯片技术

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