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在开始研究遗传密码时，Crick和他的同事坚信：T4噬菌体的rⅡB蛋白的N末端对其生长不是必需的。一个理由是存在一个名为R158G的缺失突变体，其缺失从rⅡB基因的N末端到rⅡA基因的C末端，产生一个融合的rⅡA-rⅡB蛋白，该蛋白有rⅡB的功能，但没有rⅡA的功能。从遗传数据和异源双链电子显微镜图判断，这个缺失片段约900到1100核苷酸长。以下是猜测的四个精确长度：980、984、988和1088。编码rⅡA蛋白C末端和rⅡB蛋白N末端的DNA序列表明有个14核苷酸序列把两基因隔开。这些证据是使你排除一些错误的值，到底哪些是错的呢？(换一种方式提问，r1589缺失或把rⅡA和rⅡB多肽链融合在一起的任何其他缺失必须遵循什么规律？)
A.合成一种功能蛋白或RNA分子所必需的全部DNA芋列
B.DNA分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列
C.遗传物质的最小功能单位
D.有些只有转录功能而没有翻译功能
蛋白质的对应核苷酸序列如图16-3-42。试设计一对PCR引物，每个都含与基因相同的18个核苷酸，能扩增基因的编码区，并在N端加入一个后接6个His的起始密码子，以及在C端加入6个His密码子后接一个终止密码子。
你的导师建议你用PCR来扩增该蛋白结合的少量存在的DNA分子。她的主意如图16-3-38，①合成一些26核苷酸长的随机寡核苷酸链，两边以确定的25核苷酸序列作为PCR扩增的引物位点(图16-3-38(A))；②把这些寡核苷酸加到含转录因子的细胞粗提物中，转录因子能结合到带结合位点的寡聚物上；③用该因子的抗体分离出结合到该因子上的寡核苷酸链；④PCR扩增出该核苷酸链，并分析其顺序。
你用0.2ng的单链随机序列寡聚物开始实验，用PCR引物中的一个把它转变为双链DNA。在图16-3-38(B)中，四轮选择和扩增后，用BamHI和EcoRI处理分离的DNA，把片段克隆到质粒上，并给十个不同的克隆测序(表16-3-38)。
他克莫司抑制免疫的机制是
A．降低淋巴细胞和巨噬细胞内cAMP的含量
B．结合细胞内结合蛋白，抑制IL一2的基因转录
C．干扰嘌呤代谢，抑制嘌呤核苷酸合成
D．选择性、可逆性地抑制次黄嘌呤单核苷脱氢酶
E．抑制二氢乳清酸脱氢酶(DHODH)的活性，阻断嘧啶的从头合成途径
A.通过DNA连锁分析确定待分离基因在染色体上的大概位置
B.进行分子杂交，定位基因在染色体上的具体位置
C.研究该区域内的已知基因、ORF、EST或cDNA片段，确定进一步研究对象
D.通过cDNA筛选、外显子捕获或物理捕获法在该区域内寻找和鉴定基因
E.对找到的“基因”的核苷酸序列进行分析，推测其功能
大肠杆菌阿拉伯糖的代谢调控相当复杂，不仅仅是相关基因在染色体上分散排列(如图13-3-38所示)，还有调控蛋白。AraC既是正调控因子又是负调控因子，例如，在araBAD基因簇的调控中(图13-3-41A)，当阿拉伯糖存在时(无葡萄糖)，与位点1结合的AraC蛋白可使转录比缺乏AraC蛋白的基本转录水平增强100倍。在缺乏阿拉伯糖时与位点2结合的AraC蛋白抑制araBAD基因的转录，与缺乏AraC蛋白的基础转录水平相比较大，约相差10倍。在位点2的负调控和位点1的正调控的综合作用下意味着阿拉伯糖的加入导致arcBAD基因簇转录将提高1000倍。
在位点1处结合的正调控看来是直接的，因为这个位点位于启动子附近，估计使RNA聚合酶更容易结合或激活转录起始复合物。在位点2的结合会使你更加迷惑，位点2位于转录起始点上游270核苷酸处，这样远距离的调控作用更容易使人联想到真核细胞中的增强子。为了更容易地了解位点2的抑制机制，移动整个调控区把它置于grlK基因前，这个基因编码半乳糖激酶，比araBAD基因簇编码的酶更容易分析研究。
为了确定两个araC结合位点间区域的重要性，可按图13-3-41A所示的那样在插入点插入或缺失一段核苷酸。在缺乏阿拉伯糖时启动子的活性研究是通过将细菌在特殊指示平板上进行培养来实践的，如果启动了，活性被完全抑制，菌落是白色的，如果半乳糖激酶产生，则菌落为红色，然后对照着在两个结合位点间的序列插入或缺失多少个核苷酸的图示上(图13-3-41B)，画线培养相应的细菌突变体，结果发现，红线和白线是相互散置的。
这些实验结果可以区别三种远距离抑制的潜在机制。
(1)DNA结构上的改变可以使抑制位点向转录位点分散，使启动子不适合RNA聚合酶的结合。
(2)蛋白可以在抑制位点以这样的方式协作，即附加因子不断加入，产生连锁反应，覆盖了整个启动子，由此封闭了转录过程。
(3)DNA可成环以致于蛋白在很远处的抑制位点与DNA结合就可影响转录起始点的蛋白(或DNA)。
你所得的结果证实了哪一种机制，如何解释红色及白色的条纹？
密码 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
核苷酸 AUG GCU UCU AAC UUU ACU CAG UUC GUU CUC …
氨基酸 Ala -Ser -Asn -Phe -Thr -Gln -Phe -Val -Leu …
