题目内容
(请给出正确答案)
[主观题]
酵母的Tyl元件是一种______,它的转座需一段完整RNA转录物的合成,这个转录物又被复制成一个双螺旋DNA,随后被
整合到一个新的染色体位置。
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A.编码一个位点特异的DNA内切核酸酶
B. 它的启动子中含有许多不同的功能元件
C. 任何时候在任何酵母细胞中都表达
D. 编码可以切割沉默基因座,而对MAT无作用的蛋白质
A.编码一个位点特异的DNA内切核酸酶
B.的启动子中含有许多不同的功能元件
C.任何时候在任何酵母细胞中都表达
D.编码可以切割沉默基因座,而对MAT无作用的蛋白
A.正确
B.错误
你在一种高效的克隆载体λYES(酵母一大肠杆菌中穿梭)中构建了一个cDNA文库,这种载体是由细菌噬菌体λ基因和一种可在大肠杆菌和酵母中复制的质粒重组而成,它结合了病毒和质粒克隆载体的优点。cDNA可以插入到载体的质粒部分,这样就可以在体外被包装进一个病毒衣壳,包装后的载体感染E.coli比质粒自身更有效,一旦进入E.coli,在λYES中的质粒序列可诱导脱离λ基因组进行重组并可自我复制,这就使cDNA在质粒上与λ分离,这就有利于以后的操作。
为了使克隆效率最大,载体和cDNA均用特殊的方法加以制备,在载体DNA单一独特的XhoI位点切割(5'-CTCGAG)后在dTTP存在下与DNA多聚酶一起孵育,一个制备好的钝端cDNA与一个双链寡核苷酸接头连接,这个接头由两个寡核苷酸5'-CGAGATTTACC和5'-GGTAAATC组成,其5'-末端均有磷酸基团,然后DNA和cDNA混匀并进行连接。这个方案证实非常有效,用2μg载体和0.1mg cDNA,你可以得到4×107重组分子组成的文库。