人类的一段DNA片段一端为E∞R工位点,另一端为HindⅢ位点。用32P标记EcoRⅠ一端,然后用HauⅠ或Sau3A部
(1)EcoRⅠ到HindⅢ位点间的片段有多大? (2)画出HhaⅠ和Sau3A的酶切位点。 (3)标记有32p的同样DNA片段,用HhaⅠ完全酶切,进行电泳,那么用EB染色或放射自显影,会分别得到什么样的图?
(1)EcoRⅠ到HindⅢ位点间的片段有多大? (2)画出HhaⅠ和Sau3A的酶切位点。 (3)标记有32p的同样DNA片段,用HhaⅠ完全酶切,进行电泳,那么用EB染色或放射自显影,会分别得到什么样的图?
A.人类基因组中长约200-600bp的单拷贝片段
B.人类基因组中2—6bp呈串联重复的DNA序列
C.人类基因组小长约150—400bp的cDNA文库表达序列
D.两顺序相同的互补序列在同一条DNA链上相反方向排列构成反倒位重复
E.两顺序相同的互补序列在同一条DNA链上相同方向排列构成倒位重复
人类基因组DNA经过Sau3A(G↓ATC)部分酶切后,连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上 (G↓GATCC)。BamHⅠ位于多克隆位点的SalⅠ和NotⅠ之间,二者距离20 bp。 (1)从文库中分离出某克隆(克隆1),分别用NotⅠ(N)、SalⅠ(S)或SalⅠ十NotⅠ(S十N)酶切后,电泳分离并用EB染色。DNA转移到膜上后,用载体上的DNA作为探针进行杂交,结果如下图所示:
假设同源序列50 bp以下则无杂交信号。在此基因组DNA上标上所有的SalⅠ和NotⅠ位点,标明酶切位点间距离。 (2)从同样的文库中分离到带有重叠片段的克隆(克隆2),用同样的酶切、电泳、转膜后,以克隆1的DNA为探针(包括基因组DNA和载体DNA)进行southern杂交,结果如下图所示:
画出克隆2的图,标明所有SalⅠ和NotⅠ位点及位点间距离。 (3)所有的人类基因组DNA都用SalⅠ酶切,并用来自于克隆1或克隆2的DNA为探针作Southern杂交,结果如下图所示:
其中6个SalⅠ切点的位置可以用以上的结果来确定。请画出这一区域的SalⅠ位点图。
如下图所示为基因的非必需部分中的一段DNA。这里只表示拷贝mRNA的那条链(另一条链与此问题无关)。假设,通过吖啶橙的处理,新的序列产生了。两个G从图中所示的点中插入。这将使蛋白质失活,因为阅读框发生了改变。但是,如果在第二个所示位点的G变成c,则会产生活性蛋白。试解释此现象。
Irrelevant part
T C G T A G A G G G G C A A T G A G C A A T A C C C C G C A
阅读方向 插入两个G 突变至C