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[主观题]

图13-3-5所示的是一段基因组DNA的限制酶图谱以及与其对应的cDNA限制酶谱图。这段基因组DNA中有多少个内含子?

图13-3-5所示的是一段基因组DNA的限制酶图谱以及与其对应的cDNA限制酶谱图。这段基因组DNA中有多少个内含子?它们在哪里?

限制酶简写:B:BamHI;C:ClaI;H:HindⅢ;R:EcoRI;S:SalI;AAA:poly(A)尾。

图13-3-5所示的是一段基因组DNA的限制酶图谱以及与其对应的cDNA限制酶谱图。这段基因组DNA

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第1题
入噬菌体的线性基因组DNA两端各有一段20个碱基长的单链突出,它们是可以互补的黏性末端,可以连接
起来,使DNA环化。在试管中分别对线性和环状DNA进行限制酶切割 (EcoRⅠ、BarnHⅠ或同时用二者),结果如下页图所示: (1)哪个样品是环状DNA分子? (2)线形DNA总长度是多少? (3)环状DNA的总长度是多少? (4)画出线形DNA的限制酶酶切图谱,标明EcoRⅠ和BamHⅠ所有位点。

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第2题
假定你获得了一病毒的dsDNA,并全部进行了克隆,并用有限的几种酶对该病毒基因组DNA进行了酶切分析(图Q25.11)

假定你获得了一病毒的dsDNA,并全部进行了克隆,并用有限的几种酶对该病毒基因组DNA进行了酶切分析(图Q25.11),图中所示数字的单位是kb。

图Q25.11 假设的某病毒基因组DNA的限制性酶切图谱

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第3题
人类基因组DNA经过Sau3A(G↓ATC)部分酶切后,连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上 (G↓GATCC)。BamHⅠ位于

人类基因组DNA经过Sau3A(G↓ATC)部分酶切后,连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上 (G↓GATCC)。BamHⅠ位于多克隆位点的SalⅠ和NotⅠ之间,二者距离20 bp。 (1)从文库中分离出某克隆(克隆1),分别用NotⅠ(N)、SalⅠ(S)或SalⅠ十NotⅠ(S十N)酶切后,电泳分离并用EB染色。DNA转移到膜上后,用载体上的DNA作为探针进行杂交,结果如下图所示:

假设同源序列50 bp以下则无杂交信号。在此基因组DNA上标上所有的SalⅠ和NotⅠ位点,标明酶切位点间距离。 (2)从同样的文库中分离到带有重叠片段的克隆(克隆2),用同样的酶切、电泳、转膜后,以克隆1的DNA为探针(包括基因组DNA和载体DNA)进行southern杂交,结果如下图所示:

画出克隆2的图,标明所有SalⅠ和NotⅠ位点及位点间距离。 (3)所有的人类基因组DNA都用SalⅠ酶切,并用来自于克隆1或克隆2的DNA为探针作Southern杂交,结果如下图所示:

其中6个SalⅠ切点的位置可以用以上的结果来确定。请画出这一区域的SalⅠ位点图。

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第4题
端粒是以线性染色体形式存在的真核基因组DNA的末端的一种特殊结构,是一段__________和__________
形成的一种复合体。

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第5题
下图所示某有活性的野生型基因中间的一段DNA。连字线表示相应的mRNA的阅读框。X和Y是两个未知的碱基;X'和
Y'表示互补的碱基。

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第6题
你正在研究一种在感染周期后期产生一套丰富蛋白质的DNA病毒。其中一种蛋白的mRNA被定位于线状基因组中部的一
个限制性片段。为确定精确位置,你将mRNA与纯化了的限制性片段退火,环境中具有DNA与RNA稳定杂交的双链,DNA两条链不能重新退火。电镜下检查退火的双链,结构如图8-3-28所示。在RNA/DNA杂合双链的末端为什么会有单链尾巴?

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第7题
一个研究小组正在利用一个环状双链DNA作为一种动物病毒的基因组来研究它的生命周期。实验的第一步是要确定复
制区的位置,同时决定复制是沿起点的单向还是双向进行。为此目的,先分离出复制中的分子,用限制酶在一个位点切割病毒基因组使其成为一个线性分子,然后用电镜来观察所得到的分子。图Q2.7是所观察到的一些分子。(注意:电镜下不可能区分DNA分子的两端。)根据这一结果,如何判断:

图Q2.7 从一个起点开始的双向复制

(1)复制起点是单个还是多个?

(2)复制是单向还是双向?

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第8题
来自E.coli的一个编码蛋白的基因的中间一段DNA片段序列如下所示: 5'-C C G G C T A A G C C A T G A C

来自E.coli的一个编码蛋白的基因的中间一段DNA片段序列如下所示:

5'-C C G G C T A A G C C A T G A C T A G C-3'

3'-G G C C G A T T C G G T A C T G A T C G-5'

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第9题
设定是上题中的噬菌体DNA,并假定它是双向复制的。为了确定终止作用是由于复制叉的简单相碰还是复制叉停止在
某特定的基因部位上,特意构建了一种噬菌体分子,它的右端36%~47%处有一段DNA前后重复,而59%~68%处有一段DNA缺失。观察到的分子如图6-3-47所示。试问是否存在特定的终止部位?

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第10题
如下图所示为基因的非必需部分中的一段DNA。这里只表示拷贝mRNA的那条链(另一条链与此问题无关)。假设,通过吖

如下图所示为基因的非必需部分中的一段DNA。这里只表示拷贝mRNA的那条链(另一条链与此问题无关)。假设,通过吖啶橙的处理,新的序列产生了。两个G从图中所示的点中插入。这将使蛋白质失活,因为阅读框发生了改变。但是,如果在第二个所示位点的G变成c,则会产生活性蛋白。试解释此现象。

Irrelevant part

T C G T A G A G G G G C A A T G A G C A A T A C C C C G C A

阅读方向 插入两个G 突变至C

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第11题
双向复制是在大肠杆菌入噬菌体营养生长期间用电子显微镜对部分变性DNA进行观察而首次发现的。从另一种噬菌体
颗粒中所分离到的部分变性线状DNA具有图6-3-46所示的变性图谱。如果分子正好在线状DNA中间部位单向复制,试绘图表示50%分子复制后的部分变性的环状DNA。另绘制双向复制时的图。

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