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[主观题]

用不同种类的变性DNA分子复性来制取杂交DNA时,常常留有一些不能复性的DNA。用哪些方法可除去这些不能复性的D

NA?
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第1题
DNA受热变性,下列叙述正确的是()

A.在260nm波长处的吸光度下降

B.多核苷酸键断裂成寡核苷酸键

C.碱基对可形成共价连接

D.加入互补RNA链并复性,可形成DNA-RNA杂交分子

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第2题
核酸杂交的基本原理是()。

A.变性与复性

B.DNA复制

C.转录

D.翻译

E.RNA剪切

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第3题
在某真核细胞中分离到大量mRNA。要了解每个细胞中究竟有多少份相应基因的拷贝。为此,通过对细胞总DNA的变性和
复性,得到Cot曲线。在复性不同阶段提取DNA样品,用DNA-RNA杂交测定该基因是否已复性,并用这种方式测得该基因在Cot曲线上的位置。根据大量存在的mRNA,能否预测该DNA在Cot曲线上的位置?试作解释。
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第4题
DNA受热变性时()。

A.在260nm波长处的吸光度增加

B.多核苷酸链断裂成寡核苷酸链

C.碱基对形成的氢键断裂

D.加入互补RNA链经缓慢冷却后可形成DNA/RNA杂交分子

E.溶液黏度增加

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第5题
RNA与基因组DNA的杂交已被广泛用于检测不同类DNA的转录。用DNA-drivenassociation experiment和用RNA进行的
复性实验有什么区别?
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第6题
用14N标记的生物A的DNA与等浓度的用15N标记的生物JDNA杂交,再在CsCl中离心至平衡。复性DNA总量的5%具杂种密

14N标记的生物A的DNA与等浓度的用15N标记的生物JDNA杂交,再在CsCl中离心至平衡。复性DNA总量的5%具杂种密度。以上两种生物的共同碱基顺序的比例是多少?

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第7题
正在研究的是包含三个基因的基因家族。在转录开始后差不多同一时间里细胞质中出现三个基因的mRNA分子。曾经提
出如下假设:合成的是单个转录物,以三种不同的方式(可能是随机地产生三种mRNA分子)加工。主要证据是所有这三种mRNA分子的帽子邻接着同一顺序的四个核苷酸。整个基因家族已经作为一个单位克隆在质粒pBR322中。将质粒DNA部分变性,并在DNA-RNA形成杂交的条件下加入所有这三种mRNA分子。这样,一些质粒分子具有R环,也就是说,DNA的一股链与mRNA结合,而不是与其互补链结合并形成泡状结构。在含这些mRNA的质粒的电镜照片中可以看到图13-3-71中的分子(也能见到其他形式的分子)。上述假设正确吗?

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第8题
在构建cDNA克隆之前,可以用______来富集一特殊的核苷酸序列。做法是:用来自于能够产生目的蛋白的细胞mRNA分
子同来自于另一类型细胞(不产生这种蛋白质,但亲缘关系密切)的过量mRNA分子杂交。
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第9题
下述精巧的方法曾用来构建不同酶的DNA分子的限制酶图谱。首先,利用多核苷酸酶将噬菌体DNA的5'-末端标记

下述精巧的方法曾用来构建不同酶的DNA分子的限制酶图谱。首先,利用多核苷酸酶将噬菌体DNA的5'-末端标记上32P。样品分成两半,每份用酶Ⅰ或酶Ⅱ酶解。两份酶解物分别进行电泳,记下放射性带。这个实验鉴定出末端片段,提供的信息后面有用。该技术的要点是同时利用未标记的和均一标记的DNA样品。未标记样品用酶Ⅰ酶解,进行电泳时采取措施使条带较宽。用标准的溴化乙锭荧光技术定位这些条带,记录它们的位置,将凝胶浸在碱性溶液中使DNA变性,然后将条带转移到硝酸纤维素膜上,得到图16-3-13所示的谱型。32P标记的样品用酶Ⅱ处理、电泳、记录条带位置,将DNA碱变性,然后转移到含酶Ⅰ片段的硝酸纤维素膜上。转移时使弛P条带与未标记的条带成正交,如图6-3-13所示。然后将膜置于复性条件,洗涤,用放射自显影定位放射性。图16-3-13显示每条胶中条带位置(细线)和放射性位置(小圆点)。标有星号的条带是末端片段。试画出每种酶的限制酶图谱。数字表示每个片段的长度(kb),实心圈表示放射性区域。

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第10题
两份几乎相同的DNA样品(例如从突变型和野生型病毒X得到的DNA分子)混合、变性、再退火,可得如图2-3-24所示的同

两份几乎相同的DNA样品(例如从突变型和野生型病毒X得到的DNA分子)混合、变性、再退火,可得如图2-3-24所示的同源双链和异源双链。同源双链含来自同一份DNA样品的两条链,而异源双链则含来自两份不同DNA样品的链。两份DNA样品的顺序差异导致了异源双链中因不能形成氢键配对而保持单链状态的非互补区域。若这些区域长度大于50至100个核苷酸;则在电镜下呈环状。图B显示两种常见的异源双链结构。异源双链DNA的检测对于大片段缺失、碱基添加以及取代的定位是很有效的方法。试利用图中的数据构建一个野生型DNA的图谱,算出突变型中片段缺失的位置。

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第11题
核酸酶S1能在双链DNA分子中将不配对的两碱基打断,如果从美国实验室分离到一种品系的λ噬菌体DNA分子与从法国

核酸酶S1能在双链DNA分子中将不配对的两碱基打断,如果从美国实验室分离到一种品系的λ噬菌体DNA分子与从法国实验室分离到的假定基因型是同一品系的λ噬菌体DNA分子杂交,接近一半的杂交DNA分子被S1酶切开,请解释。

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