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[主观题]

T4噬菌体能编码一种与单链DNA结合的蛋白(即SSB蛋白)。SSB蛋白对于重组和DNA的复制相当重要,编码SSB蛋白的基

T4噬菌体能编码一种与单链DNA结合的蛋白(即SSB蛋白)。SSB蛋白对于重组和DNA的复制相当重要,编码SSB蛋白的基因部位产生的温度敏感突变T4突变体在温度升高时,能迅速地停止重组和DNA复制。T4的SSB蛋白是一个分子量为35000U的伸长的单体蛋白,它能紧密结合单链DNA,而不能结合双链DNA。在DNA与蛋白质量达到1:12时结合达到饱和。然而,图12-3-16表明,SSB蛋白结合DNA有一个特殊的性质。在10μg过量单链DNA存在下,有0.5μgSSB蛋白质时实际上没有结合,而在7.0μgSSB蛋白质存在时,可观察到几乎所有定量的结合。

T4噬菌体能编码一种与单链DNA结合的蛋白(即SSB蛋白)。SSB蛋白对于重组和DNA的复制相当重要

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第1题
mRNA往往是用各种杂交技术检测的,也就是通过mRNA与单链DNA一起保温,形成DNA-RNA杂交物。有一种技术,把单链DN

mRNA往往是用各种杂交技术检测的,也就是通过mRNA与单链DNA一起保温,形成DNA-RNA杂交物。有一种技术,把单链DNA吸附在硝酸纤维素滤膜上,加上放射性标记的RNA,然后在导致杂交作用的条件下将混合物保温。游离RNA并不结合到滤膜上,所以滤膜洗涤后所结合的放射性量就是被杂交的RNA量。在某实验中,从感染噬菌体1分钟的细胞中分离出放射性mRNA,然后与分别吸咐在滤膜上的三种不同的DNA分子杂交。DNA分子如图9-3-10所示,其中的数字表示离DNA左侧的距离,相对距离范围为0~100。用野生型噬菌体(Ⅰ)感染细菌。在噬菌体DNA分子Ⅱ和Ⅲ中的阴影区代表噬菌体携带的细菌DNA。接着在两张滤膜上对各类DNA进行杂交试验,吸附有每一类DNA的一张滤膜与核酸酶一起保温(RNase,该酶酶解单链RNA但不酶解杂交的RNA);另一张滤膜不用酶处理(-RNase)。得到的数据如表9-3-10所示。试问mRNA从野生型DNA中的哪个区域转录?

表9-3-10

滤膜上的DNA滤膜上的cpm
-RNase+RNase

1250

1260

1240

1245

418

820

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第2题
为什么线形双链DNA,例如噬菌体T7,单靠大肠杆菌编码的蛋白质不能完全复制?
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第3题
噬菌体DNA进入细菌时,在实验室中通常能再分离到游离DNA,或偶尔与膜的组分结合。在哪个部分能找到f2、R17或MS-

噬菌体DNA进入细菌时,在实验室中通常能再分离到游离DNA,或偶尔与膜的组分结合。在哪个部分能找到f2、R17或MS-2的RNA?

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第4题
有人做过一个实验,将ФX174噬菌体复制型的超螺旋环和缺口环分别与噬菌体DNA中的单链片段混合。没有加入RecA蛋
白。在稍高于室温条件下其中一个分子发生链侵入,但无法找到一个温度能使两个分子都出现这样结果。试解释这些现象。
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第5题
对于单链DNA噬菌体,()链和(-)链的含义是什么?

对于单链DNA噬菌体,()链和(-)链的含义是什么?

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第6题
一种新的蛋白质X出现在受感染的细胞中。试设计几种实验以证明编码X的基因是噬菌体编码而不是宿主DNA编码的?
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第7题
用基因工程技术制备一种质粒,其含有的一个基因是编码某基因产物的mRNA拷贝。该质粒DNA分离、变性,并与该基因
的初级转录物杂交。得到如下电镜图(细线和粗线分别表示单链和双链核酸)。试问在这个基因中有多少内含子?

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第8题
胰DNase是一种对双链及单链DNA都有很强作用的核酸酶,但它极少会将DNA水解成单核苷酸。随着酶浓度的增加或DNA
起始浓度的减小,即使酶与DNA的比例不变,对酶解有抗性的DNA比例随之减小。如果酶解是在悬浮于大量缓冲液中的透析管(即小分子能通透但DNA不能通透的半透性管子)中进行,水解能彻底完成。试作解释。
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第9题
下列位点哪些是反义核酸药物的作用靶点?
下列位点哪些是反义核酸药物的作用靶点?

A、前体RNA的内含子与外显子结合区

B、mRNA的5'-末端核糖体结合位点

C、mRNA的5'-末端编码区

D、mRNA的polyA形成位点

E、与DNA双链结合

正确答案:A,B,C,D,E

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第10题
从λ噬菌体中提取的DNA用两种只攻击单链DNA的外切核酸酶处理。外切核酸酶A只从突出的5'端消化DNA,而外切
核酸酶B只攻击自由的3'端。这种处理对λ噬菌体DNA的生物活性有什么影响?
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第11题
假定某种噬菌体颗粒含有小的线性单链DNA分子。通过CsCl离心研究它的复制方式。在CsCl中,它的密度是1.714g/cm3

假定某种噬菌体颗粒含有小的线性单链DNA分子。通过CsCl离心研究它的复制方式。在CsCl中,它的密度是1.714g/cm3。含14C标记DNA的噬菌体感染生长在含3H的培养液中的细菌。于不同时间里取样,分离出DNA,对各样品进行离心。所得结果示于图6-3-42。试问这种噬菌体怎样复制它的DNA?你认为子代噬菌体会不会有14C标记?

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