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AUU AUG UAU AAG UAG GUC GCA UAA ACA CAA UUA UGA GAC UUA
实验中遇到了一些困难,主要是不能利用网织红细胞(一种体外分析蛋白质合成的标准系统)的裂解产物来翻译经纯化的四膜虫mRNA。尽管mRNA的质量很好,但翻译产物却都是小分子多肽(图Q11.1,泳道1)。为了找出不能正确翻译蛋白质产物的原因,用来自烟草花叶病毒(TMV)编码的一个分子质量为116kDa的蛋白质的纯化mRNA进行了一系列对照实验。在体外系统中,TMV mRNA可被很好地翻译,在116kDa处显现一主带和一个极弱的约50kDa的小带(图Q11.1,泳道2)。加入四膜虫RNA后,较大分子质量的产物有显著增加(图Q11.1,泳道3)。加入一些四膜虫的细胞浆(去除了核糖体),TMV mRNA几乎专一地产生分子质量较大的产物(图Q11.1,泳道4)。令人高兴的是先前无活性的四膜虫mRNA现在似乎可以被翻译了(图Q11.1,泳道4)。去除TMV mRNA后,这种推测得到证实(图Q11.1,泳道5)。
图Q11.1在来自四膜虫的各种成分加入或缺省时TMV mRNA的翻译
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