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RNA酶保护分析法(RNase protection assay,RPA)

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第1题
RNase P是在tRNA加工过程中起作用的酶,含有蛋白质和RNA两种成分,无论在体内和体外,起作用时都需要RNA和蛋白
质的存在。
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第2题
你刚收到一个包装的保证有功能的RNaseA,这是一种降解RNA而不降解DNA的酶,该酶煮沸温度下不分解。为了节省开
支你订购了最便宜的一种,这种可能含极微量的DNase——一种热敏感的核酸酶,遗憾的是,你的RNase无效,而你的DNA样品中却有少量RNA,你可能犯了什么错误?
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第3题
mRNA往往是用各种杂交技术检测的,也就是通过mRNA与单链DNA一起保温,形成DNA-RNA杂交物。有一种技术,把单链DN

mRNA往往是用各种杂交技术检测的,也就是通过mRNA与单链DNA一起保温,形成DNA-RNA杂交物。有一种技术,把单链DNA吸附在硝酸纤维素滤膜上,加上放射性标记的RNA,然后在导致杂交作用的条件下将混合物保温。游离RNA并不结合到滤膜上,所以滤膜洗涤后所结合的放射性量就是被杂交的RNA量。在某实验中,从感染噬菌体1分钟的细胞中分离出放射性mRNA,然后与分别吸咐在滤膜上的三种不同的DNA分子杂交。DNA分子如图9-3-10所示,其中的数字表示离DNA左侧的距离,相对距离范围为0~100。用野生型噬菌体(Ⅰ)感染细菌。在噬菌体DNA分子Ⅱ和Ⅲ中的阴影区代表噬菌体携带的细菌DNA。接着在两张滤膜上对各类DNA进行杂交试验,吸附有每一类DNA的一张滤膜与核酸酶一起保温(RNase,该酶酶解单链RNA但不酶解杂交的RNA);另一张滤膜不用酶处理(-RNase)。得到的数据如表9-3-10所示。试问mRNA从野生型DNA中的哪个区域转录?

表9-3-10

滤膜上的DNA滤膜上的cpm
-RNase+RNase

1250

1260

1240

1245

418

820

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第4题
RNase P中的RNA为_________,蛋白质为_________。

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第5题
RNaseⅢ的识别和作用部位是单链RNA。 ()此题为判断题(对,错)。
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第6题
用RNase T1降解长度为13个核苷酸的RNA片段,得到4种产物:(a)ApCpApGp,(b)pGp,(c)ApCpu和(d)ApApU—

用RNase T1降解长度为13个核苷酸的RNA片段,得到4种产物:(a)ApCpApGp,(b)pGp,(c)ApCpu和(d)ApApU—pApGp,用RNase I降解得到另外4种产物: (1)ApGpApApu,(2)pGpApC,(3)u和(4)ApGpApcp。根据以上资料写出该片段的碱基序列。

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第7题
有两种确定核酸中核苷酸序列的方法:化学序列分析法(Maxam-Glbert)和酶学序列分析法(Sanger)。酶学

有两种确定核酸中核苷酸序列的方法:化学序列分析法(Maxam-Glbert)和酶学序列分析法(Sanger)。酶学测序法的优点是

A.碱基与特殊染料间不同的相互作用

B.一个合成引物的延伸和DNA修复合成的可靠终止

C.可同时对DNA双螺旋的两条链进行测序

D.限制性位点与DNA末端标记的相关性

E.反应是DNA特异的,RNA不会带来干扰。这样既减少纯化步骤,也节约了开支

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第8题
写出下列反应的产物: (a)蛇毒磷酸二酯酶作用于ApupApApCpU; (b)牛胰RNase作用于ApUpApApCp

写出下列反应的产物: (a)蛇毒磷酸二酯酶作用于ApupApApCpU; (b)牛胰RNase作用于ApUpApApCpU; (c)蛇毒磷二酯酶作用于dTpdApdCpdGpdCp;(d)稀酸作用于dTpdApdCpdGpdGpdCpdA; (e)稀碱作用于dTpdApdCpdCpdGpdCpdA

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第9题
有一寡聚十六核苷酸经RN ase T1酶解得到:Gp,UpCpCpA,ApCpUpCpGp和ApUp UpCpCpGp;用RNase A酶解得
到:1 A,5 Cp,2 Up,1ApUp和1 GpGpApCp。用重叠法排出该十六核苷酸的顺序。

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第10题
在剪接体中,SnRNP上的蛋白质的功能之一似乎是

A.在第一步转酯反应中,充当核酸内切酶

B.保护SnRNA免受降解

C.识别剪接点交界处的GU-AG序列

D.促进SnRNA的正确折叠,有利于RNA调节的催化

E.促进已加工的mRNA运输出细胞核

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第11题
有关参与DNA复制的物质叙述错误的是()

A.单链DNA结合蛋白(SSB)维持模板单链状态

B.单链DNA结合蛋白(SSB)保护模板

C.引物酶是依赖DNA的RNA聚合酶

D.真核生物DNA连接酶需NAD+

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