转录的起始位点(stp)决定在模板链上嘧啶核苷酸的位置,在此形成第一个杂合的RNA和DNA碱基对。
3.转录的起始位点(stp)决定在模板链上嘧啶核苷酸的位置,在此形成第一个杂合的RNA和DNA碱基对。
假设几乎内含子刚被转录出(即合成了约500个核苷酸的RNA),一个剪接体就组装在玉米丙糖磷酸异构酶基因(含大约3400个碱基对)的第一个内含子处。如果剪接反应直到转录终止才发生,剪接体应当稳定多长时间?假设玉米RNA聚合酶Ⅱ的转录速度为每秒30个核苷酸。
A.合成一种功能蛋白或RNA分子所必需的全部DNA芋列
B.DNA分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列
C.遗传物质的最小功能单位
D.有些只有转录功能而没有翻译功能
纠正下列一段话中的错误:
在大肠杆菌中,通过RNA聚合酶同操纵基因的结合来起始转录。与转录起点碱基互补的dNTP同δ亚基结合,然后是第二个dNTP通过与第一个dNTP形成2'→5'磷酸二酯键而结合上。当生成的RNA链约有12个核苷酸长度时,β'亚基脱离DNA聚合酶,RNA链在全酶的作用下继续延伸。当DNA聚合酶在RNA链上遇到终止密码子时,转录作用停止。
因子通常已经失活。你可以想出一个极好的方法以加快分析速度。你可以合成一段不含胞嘧啶核苷酸的DNA序列,将这段序列放到启动子后在一适当反应混合物中温育,这个启动子将指导不含鸟嘌呤核苷酸的转录本的合成,如果不加GTP,只产生一定长度的RNA转录本,这个RNA转录本来自于合成的DNA序列。因为其他转录本都在需G处被终止。如果你能使这个想法得到实现,则快速分析特殊序列的转录仅通过测量标记核苷酸的放射性就可实现。
为了验证你的想法,你构建两个携带合成DNA的质粒。一个具有腺病毒的启动子(PmL1),另一个无启动子(PC1)。把两种质粒同纯化的RNApolⅡ、纯化好的转录因子样品及32P-CTP混合,除此之外,再加入各种组合的GTP、RNaseT1(可以切开RNA与G的连接)和3'-氧甲基GTP(无论何时它参入正在形成的链,它就会终止转录),通过凝胶电泳测定结果如图13-3-42所示。
导致嗜睡症的微生物锥虫,能改变其表面糖蛋白壳,从而避开宿主的免疫性防御。你现正在研究可变的表面糖蛋白(VSG)的合成,已把编码基因定位于某个染色体的近端粒处。然而你还未能将启动子定位,实验表明它可能与VSG基因相距几千个核苷酸。一个老朋友建议你利用紫外线辐射来给启动子定位,他曾经成功地用这项技术定位腺病毒转录单元。因为RNA聚合酶转录时不能通过嘧啶二聚体(紫外线辐射造成的损伤),转录过程对紫外线的敏感性可用来测定转录起始点与转录区间的距离。由于没有其他方法可选,于是你决定试一试。
你采用核糖体RNA基因的转录来检验系统。5SRNA转录单位略多于100个核苷酸,而18S、5.8S和28S和28SRNA是一个8kb长转录单元的一部分。将锥虫置于逐渐增强的紫外线照射下,分离出核,与32P-dNTP温育。接着从核中分离出RNA,将之与5SRNA和核糖体转录单元和部分克隆出的DNA杂交。以每个位点上数目的对数对紫外剂量作图,得到一条直线,直线的斜率与杂交探针距启动子的距离成比例。用来自VSG基因开始区域的探针重复这个实验,发现对VSG基因和核糖体转录单元的探针4而言,前者转录被抑制的速度较后者快7倍。