将正在进行转录和RNA加工的真核细胞与船P标记的ATP温育。那么在成熟mRNA的哪个部位会出现放射性核素?假设32P
将正在进行转录和RNA加工的真核细胞与船P标记的ATP温育。那么在成熟mRNA的哪个部位会出现放射性核素?假设32P标记在ATP的(a)α位;(b)β位;(c)γ位。
将正在进行转录和RNA加工的真核细胞与船P标记的ATP温育。那么在成熟mRNA的哪个部位会出现放射性核素?假设32P标记在ATP的(a)α位;(b)β位;(c)γ位。
围绕蛋白质表达的全过程(包括转录、翻译、蛋白翻译后加工及到达正确的作用位点),结合细胞内结构特点,简要阐述真核细胞和原核细胞的差异。
真核细胞编码蛋白质基因的启动子包含了一个基本的启动元(promotor element),这个启动元可被RNA聚合酶Ⅱ以及一些基本的转录因子(如TFⅡD,TFⅡB等)识别。但是启动子自身的基本活性很低,而且结合于启动子邻近上游区(-120~-30)或更远的增强小区域的其他特殊转录因子,对它有不变的影响。分析这些调控区发现它们一般包含有许多不同的序列特异性转录因子的结合位点。
用转染试验分析这样一个复合物调控区的某一单因子识别位点表明,结合位点的活性较低。但是连接这一结合位点的多重拷贝在一起经常会产生协同促进作用。下面显示的是关于转录因子FE结合位点的DNA保守序列(20bp)的数据。克隆这个保守DNA序列在基础启动子(basal promoter)和报道基因(reporter gene)的上游。并导入细胞培养48hr。如何叙述该实验中的激活模式?
表13-3-19 | |
拷贝数 | 报道基因活性 |
0 1 2 3 4 | 20 30 135 125 460 |
大肠杆菌阿拉伯糖的代谢调控相当复杂,不仅仅是相关基因在染色体上分散排列(如图13-3-38所示),还有调控蛋白。AraC既是正调控因子又是负调控因子,例如,在araBAD基因簇的调控中(图13-3-41A),当阿拉伯糖存在时(无葡萄糖),与位点1结合的AraC蛋白可使转录比缺乏AraC蛋白的基本转录水平增强100倍。在缺乏阿拉伯糖时与位点2结合的AraC蛋白抑制araBAD基因的转录,与缺乏AraC蛋白的基础转录水平相比较大,约相差10倍。在位点2的负调控和位点1的正调控的综合作用下意味着阿拉伯糖的加入导致arcBAD基因簇转录将提高1000倍。
在位点1处结合的正调控看来是直接的,因为这个位点位于启动子附近,估计使RNA聚合酶更容易结合或激活转录起始复合物。在位点2的结合会使你更加迷惑,位点2位于转录起始点上游270核苷酸处,这样远距离的调控作用更容易使人联想到真核细胞中的增强子。为了更容易地了解位点2的抑制机制,移动整个调控区把它置于grlK基因前,这个基因编码半乳糖激酶,比araBAD基因簇编码的酶更容易分析研究。
为了确定两个araC结合位点间区域的重要性,可按图13-3-41A所示的那样在插入点插入或缺失一段核苷酸。在缺乏阿拉伯糖时启动子的活性研究是通过将细菌在特殊指示平板上进行培养来实践的,如果启动了,活性被完全抑制,菌落是白色的,如果半乳糖激酶产生,则菌落为红色,然后对照着在两个结合位点间的序列插入或缺失多少个核苷酸的图示上(图13-3-41B),画线培养相应的细菌突变体,结果发现,红线和白线是相互散置的。
这些实验结果可以区别三种远距离抑制的潜在机制。
(1)DNA结构上的改变可以使抑制位点向转录位点分散,使启动子不适合RNA聚合酶的结合。
(2)蛋白可以在抑制位点以这样的方式协作,即附加因子不断加入,产生连锁反应,覆盖了整个启动子,由此封闭了转录过程。
(3)DNA可成环以致于蛋白在很远处的抑制位点与DNA结合就可影响转录起始点的蛋白(或DNA)。
你所得的结果证实了哪一种机制,如何解释红色及白色的条纹?
A.是转录后核蛋白体RNA(rRNA)的加工特色
B.可造成DNA分子中分隔甚远的序列彼此紧邻
C.切除原始转录本中所有非信息序列
D.通常是转录后mRNA的第一道加工工序
E.由能识别并且切除内含子的酶催化进行
锥虫线粒体中的RNA编辑:
A.更改许多mRNA的编码能力。
B.在每种mRNA上只造成一个变化。
C.增加或减去G残基。
D.需要使用引导RNA,而这种引导RNA可与紧邻着编辑区的mRNA区配对。
E.需要引导RNA,引导RNA有短的区域可与编辑后的mRNA配对。
F.以与转录一致的方向进行加工。
人类线粒体基因组中
A.产生唯一一个大的转录物,然后剪接加工,释放出各种RNA分子
B.几乎所有的DNA不编码基因产物
C.大多数编码蛋白的基因是连续的
D.几乎所有编码蛋白质的基因都从不同的方向进行转录