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用单链环状噬菌体DNA作为模板，有可能在大肠杆菌抽提液中合成前体片段(冈崎片段)。反应所产生的DNA链与环状模板互补，一端带有RNA片段。当用4种α32P标记的脱氧核糖核苷三磷酸进行合成，而产物再降解成3'-核苷酸时，放射性在这4种核苷酸中的分布列入表6-3-25的第一行中。下面4行列入在4种脱氧核糖核苷三磷酸中只有一种是放射性时的结果。
| 表6-3-25 | ||||
| 32P标记底物 | 分离的3'-核苷酸 | |||
| Ap | Gp | Cp | UP | |
| 每个生长点片段的32P原子 | ||||
| 4种核苷酸 dATP dGTP dCTP dTTP | 0.99 0.20 0.72 ＜0.01 0.08 | ＜0.01 — — — — | ＜0.01 — — — — | ＜0.01 — — — — |
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温和噬菌体P4的DNA是线状双链分子，长11.54kb，具粘性末端。用Bam限制酶完全酶解得到长度为6.4、4.1、1.0kb的片段。用Bam部分酶解得到长度为10.5、7.4、6.4、4.1和1.0kb的片段。用DNA连接酶获得的环状P4DNA可以用Bam酶解得到长度为6.4和5.1kb的片段。
mRNA往往是用各种杂交技术检测的，也就是通过mRNA与单链DNA一起保温，形成DNA-RNA杂交物。有一种技术，把单链DNA吸附在硝酸纤维素滤膜上，加上放射性标记的RNA，然后在导致杂交作用的条件下将混合物保温。游离RNA并不结合到滤膜上，所以滤膜洗涤后所结合的放射性量就是被杂交的RNA量。在某实验中，从感染噬菌体1分钟的细胞中分离出放射性mRNA，然后与分别吸咐在滤膜上的三种不同的DNA分子杂交。DNA分子如图9-3-10所示，其中的数字表示离DNA左侧的距离，相对距离范围为0～100。用野生型噬菌体(Ⅰ)感染细菌。在噬菌体DNA分子Ⅱ和Ⅲ中的阴影区代表噬菌体携带的细菌DNA。接着在两张滤膜上对各类DNA进行杂交试验，吸附有每一类DNA的一张滤膜与核酸酶一起保温(RNase，该酶酶解单链RNA但不酶解杂交的RNA)；另一张滤膜不用酶处理(-RNase)。得到的数据如表9-3-10所示。试问mRNA从野生型DNA中的哪个区域转录？
| 表9-3-10 | ||
| 滤膜上的DNA | 滤膜上的cpm | |
| -RNase | +RNase | |
| Ⅰ Ⅱ Ⅲ | 1250 1260 1240 | 1245 418 820 |
A.既能高效感染大肠杆菌，又能高效感染枯草杆菌
B. 在成熟的λ噬菌体颗粒中，其DNA呈双链环状分子
C. 改造成载体后，可携带较长的外源DNA片段
D. 重组的噬菌体易于筛选和储存
从λ噬菌体提取的DNA是线形双链的，但具有长达12核苷酸残基的以5'-P结尾的单链互补末端(粘性末端)。将此λDNA：①用细菌碱性磷酸酯酶处理；②用γ-32P-ATP(腺苷三磷酸)和多核苷酸激酶处理；③让它在0.1mol/L的NaCl溶液中在5℃下以低浓度放置一星期，使分子环化；④用DNA连接酶处理；⑤用脾磷酸二酯酶和微球菌核酸酶处理。酶解产物再用层析分离鉴定，发现惟一的放射性产物是32P-鸟苷-3'-单磷酸。从这些发现可得到什么信息？
噬菌体中DNA分子具有短的互补的单链末端，当它感染细菌时该分子环化。图16-3-7的A和B分别显示用Bam限制酶处理游离的DNA分子后得到的限制酶图谱和凝胶电泳条带。从受感染的细胞中分离出DNA进行特性研究。在某些条件下酶解后的片段经电泳后结果如图16-3-7C所示。试问在这些条件下DNA呈怎样的结构？
