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[主观题]
Ⅰ类限制酶识别DNA的位点和切割的DNA位点是不同的，切割位点的识别结合有两种模型，一种是______，另一种是____
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A.必须分离纯化出个体染色体。
B.DNA必须仅从单倍体细胞(基因组)分离，这可避免由于二倍体细胞中同源染色体的存在而引起的模糊信息。
C.必须进行单个染色体分析，这样的分析仅在细胞分裂后期才有可能进行。
D.必须发现一些在染色体上仅有一个切割位点的限制酶。
E.必须先分离核DNA和细胞器DNA，然后用它们来分析个体的图谱。
人类基因组DNA经过Sau3A(G↓ATC)部分酶切后，连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上 (G↓GATCC)。BamHⅠ位于多克隆位点的SalⅠ和NotⅠ之间，二者距离20 bp。 (1)从文库中分离出某克隆(克隆1)，分别用NotⅠ(N)、SalⅠ(S)或SalⅠ十NotⅠ(S十N)酶切后，电泳分离并用EB染色。DNA转移到膜上后，用载体上的DNA作为探针进行杂交，结果如下图所示：
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假设同源序列50 bp以下则无杂交信号。在此基因组DNA上标上所有的SalⅠ和NotⅠ位点，标明酶切位点间距离。 (2)从同样的文库中分离到带有重叠片段的克隆(克隆2)，用同样的酶切、电泳、转膜后，以克隆1的DNA为探针(包括基因组DNA和载体DNA)进行southern杂交，结果如下图所示：
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画出克隆2的图，标明所有SalⅠ和NotⅠ位点及位点间距离。 (3)所有的人类基因组DNA都用SalⅠ酶切，并用来自于克隆1或克隆2的DNA为探针作Southern杂交，结果如下图所示：
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其中6个SalⅠ切点的位置可以用以上的结果来确定。请画出这一区域的SalⅠ位点图。
A.编码一个位点特异性的DNA内切酶。
B.有一个包含许多不同应答元件的启动子。
C.在所有酵母细胞中始终表达。
D.编码一个能切割沉默基因座而不切割MAT基因座的产物。
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(1)EcoRⅠ到HindⅢ位点间的片段有多大？ (2)画出HhaⅠ和Sau3A的酶切位点。 (3)标记有32p的同样DNA片段，用HhaⅠ完全酶切，进行电泳，那么用EB染色或放射自显影，会分别得到什么样的图？
用EcoRI酶解具有单个EcoRI位点的Tet-r质粒。将样品退火，用DNA连接酶处理，然后进行CaCl2转化实验。挑选Tet-r菌落。从这些菌落中分离出质粒DNA，进行凝胶电泳，结果发现有两类菌落：一类菌落在原来质粒的预期位置处出现一条带；另一类菌落则得到一条移动慢得多的带。这条移动慢的带可能是何物？(用BglI酶处理Kan-rAmp-r质粒会破坏amp基因)
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