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题目内容（请给出正确答案）

[单选题]

EcoR Ⅰ切割载体DNA和供体DNA所产生的片段在用于重组连接前要( )。

A.用65℃处理5～10 min使限制性内切核酸酶失活

B. 用CIP处理载体DNA防止自身环化

C. 进行琼脂糖凝胶电泳检测

D. 上述说法都正确

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第1题

用限制性内切核酸酶切割载体DNA、供体DNA后，要加入EDTA-SDS终止液使限制性内切核酸酶失活，这样有利于重组连

接。

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第2题

限制性内切核酸酶Bgl Ⅱ识别的序列为A↓GATCT，BamH Ⅰ识别的序列为G↓GATCC，用它们分别切割载体DNA和供体DNA，不

必使酶失活就可以直接通过黏性末端连接法进行连接。

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第3题

以EcoR Ⅰ分别酶切载体和片段DNA，重新连接前要进行下列哪些操作( )

A.65℃处理5～10分钟，使EcoR Ⅰ失活

B.CIP处理载体DNA，防止自身环化

C.琼脂糖凝胶电泳检测

D.A+B+C

E.A+C

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第4题

某种长3 kb的质粒带有一个氨苄青霉素抗性基因和一个四环素抗性基因，该质粒含有下列酶的单一位点：

EcoRⅠ、BglⅡ、HindⅢ、PstⅠ、SalⅠ。如果DNA克隆到EcoRⅠ位点，两种基因抗性都不受影响；DNA克隆到．BglⅡ、HindⅢ或SalⅠ位点，会破坏四环素抗性；DNA克隆到PstⅠ位点，会破坏氨苄青霉素抗性。用限制酶完全切割该质粒，得到以下结果：

(1)画出该质粒的酶切图谱，标明抗性基因的位置和酶切位点。 (2)如用HindⅢ切割未标记的上述DNA片段，得到5．5 kb和2．5 kb两段。如果在EcoRⅠ的3．5 kb酶切片段上没有HindⅢ切点，则用双酶(EcoRⅠ+HindⅢ)切割后会得到什么样的片段？

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第5题

入噬菌体的线性基因组DNA两端各有一段20个碱基长的单链突出，它们是可以互补的黏性末端，可以连接

起来，使DNA环化。在试管中分别对线性和环状DNA进行限制酶切割 (EcoRⅠ、BarnHⅠ或同时用二者)，结果如下页图所示： (1)哪个样品是环状DNA分子？ (2)线形DNA总长度是多少？ (3)环状DNA的总长度是多少？ (4)画出线形DNA的限制酶酶切图谱，标明EcoRⅠ和BamHⅠ所有位点。

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第6题

某双链DNA，以32P标记5’端，然后分别用EcoRⅠ和BamHⅠ酶切，得到下列长短的片段（单位为kb)，*表示带标

某双链DNA，以32P标记5’端，然后分别用EcoRⅠ和BamHⅠ酶切，得到下列长短的片段(单位为kb)，*表示带标记片段。 EcoRⅠ：2．8、4．6、6．2 *、7．4、8．0 * BamHⅠ：6．0 *、10．0 *、1 3．0 如果不带标记的DNA用两种酶同时切割，会得到下列片段：1．0，2．0，2．8，3．6，6．0，6．2，7．4。两种酶的酶切图谱是什么？

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第7题

限制酶EcoR I的识别序列为GAATTC，切割位点在对称轴的5末端，Pst I的识别序列为CTGCAG，切割位点在

对称轴的3末端。试写出切割后DNA分子的5和3末端，如将切割后的DNA分子与4种dNTPs和DNA聚合酶I一起温育，则产生什么样的末端？如需连接经上步骤处理的末端，如何能够完成？

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第8题

某些酵母菌株的细胞质中，含有周长为2μm的环状DNA分子。一些菌株中的这类DNA分子有单一的EcoRⅠ位点

，另一些菌株中有两个这样的位点。生成的二倍体芽中，两种DNA分子都存在。 (1)2μm DNA分子的遗传方式是否与线粒体相同？ (2)用放射性标记的2μm DNA作为探针，与从二倍体细胞所产生的子囊孢子中提取的，经过EcoRⅠ处理的DNA进行杂交，会得到什么结果？

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第9题

下列（)是克隆所不需要的。A．限制性内切酶B．甲基化酶C．供体DNAD．DNA连接酶

下列()是克隆所不需要的。