去除5’末端磷酸基团,防止自身环化的酶是()。A. 限制性内切核酸酶 B. D.N.A.连接酶
去除5’末端磷酸基团,防止自身环化的酶是()。
A. 限制性内切核酸酶
B.
D.
N.A.连接酶
C. 反转录酶
D. TA.Q
D.
N.A.聚合酶
E. 碱性磷酸酶
去除5’末端磷酸基团,防止自身环化的酶是()。
A. 限制性内切核酸酶
B.
D.
N.A.连接酶
C. 反转录酶
D. TA.Q
D.
N.A.聚合酶
E. 碱性磷酸酶
从λ噬菌体提取的DNA是线形双链的,但具有长达12核苷酸残基的以5'-P结尾的单链互补末端(粘性末端)。将此λDNA:①用细菌碱性磷酸酯酶处理;②用γ-32P-ATP(腺苷三磷酸)和多核苷酸激酶处理;③让它在0.1mol/L的NaCl溶液中在5℃下以低浓度放置一星期,使分子环化;④用DNA连接酶处理;⑤用脾磷酸二酯酶和微球菌核酸酶处理。酶解产物再用层析分离鉴定,发现惟一的放射性产物是32P-鸟苷-3'-单磷酸。从这些发现可得到什么信息?
A.65℃处理5~10分钟,使EcoR Ⅰ失活
B.CIP处理载体DNA,防止自身环化
C.琼脂糖凝胶电泳检测
D.A+B+C
E.A+C
你在一种高效的克隆载体λYES(酵母一大肠杆菌中穿梭)中构建了一个cDNA文库,这种载体是由细菌噬菌体λ基因和一种可在大肠杆菌和酵母中复制的质粒重组而成,它结合了病毒和质粒克隆载体的优点。cDNA可以插入到载体的质粒部分,这样就可以在体外被包装进一个病毒衣壳,包装后的载体感染E.coli比质粒自身更有效,一旦进入E.coli,在λYES中的质粒序列可诱导脱离λ基因组进行重组并可自我复制,这就使cDNA在质粒上与λ分离,这就有利于以后的操作。
为了使克隆效率最大,载体和cDNA均用特殊的方法加以制备,在载体DNA单一独特的XhoI位点切割(5'-CTCGAG)后在dTTP存在下与DNA多聚酶一起孵育,一个制备好的钝端cDNA与一个双链寡核苷酸接头连接,这个接头由两个寡核苷酸5'-CGAGATTTACC和5'-GGTAAATC组成,其5'-末端均有磷酸基团,然后DNA和cDNA混匀并进行连接。这个方案证实非常有效,用2μg载体和0.1mg cDNA,你可以得到4×107重组分子组成的文库。
典型苯丙酮尿症是由于患儿肝细胞缺乏
A.鸟苷三磷酸环化水合酶
B.6一丙酮酰四氢蝶呤合成酶
C.二氢生物蝶呤还原酶
D.苯丙氨酸羟化酶
E.葡萄糖醛酸转移酶
A.用65℃处理5~10 min使限制性内切核酸酶失活
B. 用CIP处理载体DNA防止自身环化
C. 进行琼脂糖凝胶电泳检测
D. 上述说法都正确
噬菌体中DNA分子具有短的互补的单链末端,当它感染细菌时该分子环化。图16-3-7的A和B分别显示用Bam限制酶处理游离的DNA分子后得到的限制酶图谱和凝胶电泳条带。从受感染的细胞中分离出DNA进行特性研究。在某些条件下酶解后的片段经电泳后结果如图16-3-7C所示。试问在这些条件下DNA呈怎样的结构?